nAChR胞內環蛋白保護重症肌無力模型小鼠的機制研究

《nAChR胞內環蛋白保護重症肌無力模型小鼠的機制研究》是依託中國人民解放軍第四軍醫大學，由徐江擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：nAChR胞內環蛋白保護重症肌無力模型小鼠的機制研究
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：徐江
• 依託單位：中國人民解放軍第四軍醫大學

中文摘要

重症肌無力（MG）是一種抗體介導的自身免疫病，該病的致病因子是B細胞分泌的菸鹼型乙醯膽鹼受體(nAChR)胞外域抗體，其水平同疾病的發展密切相關，但其消長受哪些體液因素影響尚不明確。以 nAChR胞內環蛋白免疫可降低MG模型(EAMG) 小鼠體內的nAChR胞外域抗體滴度，阻止其發病，並且,該保護作用可由血清中的抗體成分轉移給其他EAMG小鼠。據此，我們認為，nAChR胞內環抗體是EAMG的保護因子，並猜測nAChR胞內環抗體可能通過抗原抗體複合物選擇性作用於分泌nAChR胞外域抗體的B細胞，對其產生抑制作用，從而降低nAChR胞外域抗體滴度，阻止EAMG小鼠發病。本研究擬採用分子生物學和細胞生物學手段，從動物實驗和體外實驗兩個層面對該猜想加以證明，具有重要的理論意義和套用前景。

結題摘要

本研究擬從動物實驗和臨床研究兩方面證明nAChR胞內環抗體對EAMG或MG有保護作用，為此我們建立了純化眼鏡蛇α-神經毒素的方法，並以之建立了純化大鼠肌肉nAChR的方法，但最終未能純化出足夠量的肌肉nAChR建立EAMG模型,最終未能在EAMG模型上驗證我們的假說。另一方面，利用基因重組表達技術，我們表達並純化了nAChR胞內環蛋白及其串聯蛋白，以此為抗原獲得了胞內環抗血清，證明了胞內環抗體可以沉澱Triton X-100溶液溶解的天然nAChR，此結果提示，文獻中報導的nAChR胞內環保護EAMG的現象也許可以通過胞內環抗體的負反饋調節機制解釋。進而我們以放射性同位素125I標記的nAChR胞內環蛋白建立了檢測血清胞內環抗體的方法，以此檢測了77例MG患者及40例正常人的血清抗-nAChR胞內環抗體水平，均檢測到nM級別的抗體，個別MG患者的血清抗-nAChR抗體水平明顯增高，但MG組與正常對照組的nAChR胞內環抗體均值並無顯著差異。綜上，以上結果說明，nAChR胞內環抗體的免疫調節作用也許是nAChR胞內環蛋白保護EAMG的機制之一，但因為研究手段所限，我們還沒有找到MG血清中有，而正常人血清中沒有nAChR胞內環抗體的證據。目前得到的MG血清nAChR CL抗體的結果還不能用於分析其與MG 血清nAChR抗體之間的關係。