《microRNA-224在牙釉質發育中的作用及機制研究》是依託四川大學，由鄭黎薇擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：microRNA-224在牙釉質發育中的作用及機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：鄭黎薇
- 依託單位：四川大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
牙釉質是脊椎動物體內最堅硬的礦化組織，由緊密排列的羥基磷灰石晶體組成。其形成過程有賴於終末分化的成釉細胞分泌細胞外釉質基質並介導生物礦化。成釉細胞所表達的離子通道蛋白參與了細胞外基質環境pH值的調節，並推動了牙釉質形成與礦化過程。本課題組前期研究顯示，在牙發育過程中存在差異性表達的microRNA miR-224，其預測靶基因包括了成釉細胞緩衝系統中的兩種離子通道蛋白基因，SLC4A4及CFTR。miR-224同時對這兩種基因的靶向作用提示其可能參與牙釉質發育及礦化過程的調控。本課題試圖研究miR-224在人牙胚成釉細胞系細胞中的時空性表達特點，並通過體外細胞學實驗驗證其與靶基因mRNA的直接作用關係，及miR-224對上皮細胞分化的影響。同時利用動物實驗模型，在體內驗證miR-224對牙釉質形成與礦化的影響，進一步闡明miR-224在牙釉質發育過程中的作用及分子生物學機制。
結題摘要
牙釉質是脊椎動物體內最堅硬的礦化組織，由緊密排列的羥基磷灰石晶體組成。其形成過程有賴於終末分化的成釉細胞分泌細胞外釉質基質並介導生物礦化。成釉細胞所表達的離子通道蛋白參與了細胞外基質環境pH值的調節，並推動了牙釉質形成與礦化過程。課題前期研究顯示，牙發育過程中存在差異性表達的microRNA miR-224，其預測靶基因包括了成釉細胞緩衝系統中的兩種離子通道蛋白基因SLC4A4和CFTR。本課題驗證了miR-224在人成釉細胞分化不同階段具有時空性表達特點，隨成釉分化過程表達下調，而成釉細胞離子通道蛋白SLC4A4和CFTR基因表達上升，與miR-224的表達趨勢呈負相關性。利用miR-224的擬似物和拮抗物模擬細胞內miR-224的過表達和低表達狀態，發現miR-224在人成釉細胞及口腔上皮細胞中具有功能性調控SLC4A4和CFTR表達水平的作用，且直接與其mRNA的3’ 非編碼區結合，在轉錄後水平特異性調控離子通道蛋白的表達。利用miR-224的擬似物構建小鼠切牙頸環區miR-224過表達的動物模型，驗證了miR-224對小鼠切牙牙釉質發育過程的調節作用，miR-224過表達下調成釉細胞離子通道蛋白SLC4A4和CFTR的表達，影響牙釉質微觀結構的形成、鈣磷的含量構成比及牙釉質的顯微硬度，提示miR-224對牙釉質礦化的調控作用。該研究探索了miR-224通過調控成釉細胞離子通道蛋白SLC4A4和CFTR的表達，調控牙釉質礦化過程，完善microRNA在牙釉質發育過程中的調控作用理論。
