microRNA作為早期診斷深靜脈血栓生物標誌物的研究

《microRNA作為早期診斷深靜脈血栓生物標誌物的研究》是依託南京大學，由蔣青擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：microRNA作為早期診斷深靜脈血栓生物標誌物的研究
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：蔣青
• 依託單位：南京大學

項目摘要

人工關節置換術後深靜脈血栓（deep vein thrombosis, DVT）是一種常見的骨科術後併發症,其導致的肺動脈栓塞是術後患者死亡的首要因素。目前用於診斷DVT的臨床措施尚不完善,進而導致該疾病一定程度的漏診。而近年來研究人員在對腫瘤等疾病的研究過程中發現microRNA（miRNA）可以作為早期診斷多種疾病的生物標誌物，但這些研究尚未直接涉及DVT。本課題通過建立人工關節置換術後深靜脈造影患者血漿庫，採用RNA抽提、低密度晶片、實時定量PCR等方法，尋找與DVT發生髮展相關的血漿miRNA，並使用RNA沉默等方法分析目標miRNA調控DVT發病的信號通路，最後通過統計學分析歸納出可以作為早期診斷DVT生物標誌物的血漿miRNA，指導術後DVT的早期診斷和治療。

結題摘要

本課題組在國家自然基金面上項目“microRNA 作為早期診斷深靜脈血栓生物標誌物的研究”的支持下，已募集DVT患者靜脈造影庫及血液標本數量已經超過3000例，並在不斷的增加。其中關節置換術後下肢深靜脈血靜脈造影庫超過2200例，關節鏡手術後下肢術後深靜脈血靜脈造影庫超過800例，臨床資料完備包括深靜脈造影資料、手術方式、手術時間、抗凝方案、凝血三項等指標。實驗人員以血液標本為基礎，建立起相對應的血漿庫、血清庫和DNA庫，研究了DVT的遺傳學相關性，即NOS3基因位點rs1799983與DVT的發生顯著相關，該位點T等位基因型是骨科術後患者發生DVT的危險因素。我們進一步通過動物模型及動物體內實驗證實了NO微泡可促進血栓的溶解，其作用機制可能與NO微泡對血小板及炎性細胞聚集的抑制作用相關。 本課題也找到了相應microRNA作為影響DVT的標記物，我們通過miRNA掃描晶片研究發現338個miRNA在DVT患者中的含量相對於正常人發生了顯著變化，最後發現miR-582, miR-195, miR-532在DVT患者組中含量顯著升高。我們目前通過蛋白質組學，利用TripleTOF5600質譜平台篩選出了擬行全膝關節置換術患者免疫炎症，凝血，營養方面的血液蛋白標誌物（如C5、Plg、Pros、apoB），從而構建了預測患者術後血栓發病率的血漿蛋白質組層面的評價體系，並篩選出潛在的預測擬行全膝關節置換術患者並發血栓的相關蛋白。研究結果還需要進一步驗證研究，階段性結果正在撰寫中。本課題還對DVT患者進行了詳實的術後隨訪，關注病人愈後，統計出了一系列和術後下肢深靜脈血栓的發生率研究統計，認為DVT和年齡、體重指數、膽固醇、高密度脂蛋白、載脂蛋白A血管評分及患者的惡性腫瘤病史都顯著相關。我們通過在完成本項目的同時，共發表高質量論文19篇，另有數篇論文在攥寫中。