《miRNA142-3p在結腸癌細胞中表達的調控及其在乾性維持中的作用》是依託上海交通大學，由沈煒煒擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：miRNA142-3p在結腸癌細胞中表達的調控及其在乾性維持中的作用
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：沈煒煒
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
本課題組通過前期研究發現一類小分子miRNA142-3p通過下調結腸癌腫瘤幹細胞相關的三個表面標記物CD133、ABCG2和Lgr5抑制細胞增殖，同時該小分子本身又受幹細胞相關轉錄因子調控。本課題將在此基礎上研究：①miR142-3p的表達差異與結腸分化、結腸腺癌分化程度及5年生存率的相關性；②miR142-3p 通過調控結腸癌幹細胞相關蛋白CD133、ABCG2和Lgr5對結腸癌細胞生物學行為的影響；③miR142-3p表達的調控及其調控機制；④建立動物模型，初步探討miR142-3p對結腸癌的治療作用
結題摘要
本項目我們首次報導microRNA-142-3p (miR-142-3p)可以同時調節三個結腸癌相關表面標記物CD133, Lgr5 和ABCG2。 我們發現，在結腸炎症、腺瘤和腺癌等病變中，結腸癌幹細胞三個經典的標記物CD133、ABCG2和Lgr5在高度增生的腺體細胞表達，在腺癌細胞的表達強度與腫瘤的分化程度成正比。生物信息學軟體預測發現三個結腸癌幹細胞標記物的3’UTR區或編碼區都有miR-142-3p的結合位點。Western Blot檢測發現過表達miR-142-3p不僅能夠下調結腸癌細胞內源性三個標誌分子的表達，也能使外源性三種蛋白質表達下調。反之，該小分子抑制物顯著上調CD133、ABCG2和Lgr5的表達，證明CD133、ABCG2和Lgr5這三個結腸癌幹細胞標記物是miR-142-3p的下游調控靶蛋白。 為進一步明確該小分子和三個標記物的關係，我們在連續組織切片中檢測了它們在結腸癌組織的表達情況，發現miR-142-3p與三個標記物的表達顯著負相關，miR-142-3p與結腸癌的分化程度和腫塊大小負相關。 已知CD133、ABCG2和Lgr5分別通過不同的途徑與腫瘤幹細胞的惡性增殖及耐藥相關，為證明miR-142-3p通過下調上述乾性靶蛋白抑制結腸癌細胞增殖、提高腫瘤細胞對化療藥物的敏感性， 我們在三個標記物都表達的結腸癌細胞系中過表達miR-142-3p，發現三種蛋白質表達顯著抑制的同時，伴隨結腸癌腫瘤細胞cyclinD1的下調、細胞周期阻滯在G1期、細胞增殖抑制及細胞耐藥性的降低。本研究還發現，該小分子本身又受到了幹細胞相關的轉錄因子OCT4的強力下調。通過顯微切割技術，我們發現OCT4之所以在結腸癌中高表達從而下調miR-142-3p是因為該基因本身啟動子甲基化的原因。動物實驗（裸鼠核瘤實驗）進一步驗證了小分子miR-142-3p通過下調腫瘤細胞中CD133, Lgr5, and ABCG2的表達，從而對腫瘤細胞起到抑制作用。 本課題繪製出新的以miR-142-3p為中心的結腸癌細胞乾性相關的網路信號調節通路。通過以上研究結果，我們得出結論，乾性轉錄因子OCT4/miR-142-3p/三種腫瘤乾性標誌分子調控網路在結腸黏膜上皮發育過程中發揮重要作用， 這一調控網路的異常可能是結腸
