基本介紹
- 中文名：miRNA mimics
- 屬於：模擬生物體內源的miRNAs
- 方法：化學合成
- 功能：增強內源性miRNA
概念,發展,
概念
miRNA mimics是模擬生物體內源的miRNAs，運用化學合成的方法合成，能增強內源性miRNA的功能。而miRNA inhibitor是化學修飾的專門針對細胞中特異的靶miRNA的抑制劑。
發展
近年來人工合成的miRNA（artificial miRNA，amiRNA）已經成功套用於沉默預期靶基因的表達及其功能研究，人工合成的miRNAs既能夠特異性地沉默單一基因，也可以同時沉默多個相關但不相同的基因。miRNA mimics進一步增強內源miRNA的沉默作用，降低細胞內蛋白表達量，進行功能獲得性（gain-of-function）研究；相反，使用化學合成的方法合成miRNA inhibitors，特異的靶向和敲除單個的miRNA分子，可以削弱內源miRNA的基因沉默效應，提高蛋白表達量，進行功能缺失性（loss-of-function）研究，可以用來篩選miRNA靶位點，篩選調控某一基因表達的miRNA，篩選影響細胞發育過程的miRNA。化學合成miRNA mimics和inhibitors是近年來研究的一個新熱點，已經成為研究動植物基因家族功能的有用工具，並有望成為癌症治療和臨床研究的一種新策略。
序列分析表明，至少有1/3的人類基因與miRNA調控相關，而且越來越多的試驗證據表明miRNA還有很多功能未被發現。研究基因的功能通常是將其從基因組中敲除，然後觀察敲除前後的變化，但在破譯miRNA的功能，我們一般不會採用這種策略，而是通過增強或減弱該miRNA的表達來鑑定其功能。
miRNA mimic能模擬細胞中內源性成熟miRNA的高水平表達，以增強內源性miRNA的調控作用，是miRNA功能研究的一大利器。miRNA mimic是一種簡單高效的miRNA研究工具，只需用轉染試劑包裹即可轉染進入細胞，無需構建載體的繁瑣操作，無需病毒防護方面的擔憂，用轉染對照即可觀察其轉染效率。
miRNA mimic的轉染效果，可從靶基因的RNA表達水平，蛋白表達水平，細胞功能等方面檢測。這些實驗能夠獲得miRNA的生物學功能數據，及套用於miRNA的靶基因驗證方面。通常這些實驗涉及到miRNA mimic的轉染，或者與報告基因載體共轉。
在MEF細胞內轉染miRNA表達載體(2ug/mL)或者miRNA mimic(50nM)，48h後檢測miRNA的表達，結果顯示，表達載體僅能實現10倍的過表達，而miRNA mimic可實現600倍以上的過表達。對於短期(<1周)的miRNA功能獲得性細胞研究而言，miRNA mimic是最好的選擇。
