《miR-532-5p調控RUNX3表達介導胃癌發生髮展的分子機制》是依託山東大學，由徐霞擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：miR-532-5p調控RUNX3表達介導胃癌發生髮展的分子機制
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：徐霞
- 依託單位：山東大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
RUNX3是調節胃上皮細胞生長的重要轉錄因子，50-70%的人類原發性胃癌及多種胃癌細胞系中Runx3表達下調或缺失。等位基因雜合性缺失和啟動子過度甲基化尚不能完全解釋RUNX3失活。miRNA在轉錄後基因表達調控中發揮重要作用。生物信息學分析顯示miR-532-5p可以結合在RUNX3 3'非翻譯區。申請者首次發現，miR-532-5p在多株人胃癌細胞中高表達，與RUNX3蛋白表達呈負相關。轉染miR-532-5p表達質粒或mimics可以下調RUNX3蛋白表達，而inhibitor則上調RUNX3表達。流式分析結果表明mimics可以減少胃癌細胞的凋亡率。本課題擬在前期研究基礎上1、解析miR-532-5p負性調節RUNX3表達的分子機制；2、闡明miR-532-5p對胃癌細胞生物學功能的影響及其分子機制；3、臨床標本及裸鼠成瘤實驗評價miR-532-5p的功能及對RUNX3的調控。
結題摘要
深入研究胃癌發生、發展及其轉歸的分子機制是尋找有效的診斷標誌和改進治療方案的根本。近年來，miRNA的發現及其研究領域的興起開啟了胃癌發生髮展機制研究的新篇章。 miR-532-5p位於人類染色體Xp11.23，成熟序列由22個核苷酸構成。生物信息學軟體ClustalW serve分析不同物種miR-532-5p 序列顯示，物種間成熟序列極其保守，表明miR-532-5p在物種進化中發揮重要作用。miR-532-5p與人類胃癌的關係在本課題之前尚未見報導，因此我們的研究旨在闡明miR-532-5p對人類胃癌的影響及其相關的調控機制。 瞬時轉染miR-532-5p特異性mimics和穩定過表達miR-532-5p在體外能夠明顯增強胃癌細胞的克隆形成和遷移能力，減少G1期細胞的比例和凋亡細胞比例，在體內能夠促進裸鼠肺臟轉移瘤的形成，使肺組織重量增加，瘤結節數目增多。功能獲得實驗、功能缺失實驗、細胞表達譜分析和裸鼠轉移瘤實驗均顯示miR-532-5p能負性調節轉錄因子RUNX3及其靶基因的表達，螢光素酶活性分析結果證明RUNX3是miR-532-5p調控的直接靶分子。臨床標本檢測顯示miR-532-5p在近一半的原發性胃癌組織中過表達。這些研究結果說明，miR-532-5p能夠增強胃癌細胞的生長、遷移和侵襲能力而發揮致癌性miRNA的作用，為解析胃癌發生和侵襲轉移的分子機制提供了必要的理論支持。
