《miR-382調節EMT-MET對腎小管間質纖維化分子病理機制的意義》是依託復旦大學，由方藝擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：miR-382調節EMT-MET對腎小管間質纖維化分子病理機制的意義
- 依託單位：復旦大學
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：方藝
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
腎小管間質纖維化是所有慢性腎臟疾病的共同病理特徵，而腎小管間質纖維化.的發生與腎小管上皮細胞EMT轉化及腎間質細胞MET逆轉的實時調節密切關聯。微小RNA.（microRNAs,miRNAs）是近年來發現的參與基因調節的重要分子，但其在腎小管間質纖維化.發病過程中對EMT-MET的平衡調控作用目前尚未明了。項目組前期工作發現miR-382在體外.HK2細胞建立的 EMT模型和EMT體內模型- - 單側輸尿管梗阻的小鼠患側腎組織中高表達，.本項目擬在該工作基礎上深入研究，結合體內體外實驗研究和臨床腎穿刺病理標本分析結.果，進一步明確miR-382在腎臟EMT-MET調控中的作用機制及其相關的效應靶基因，從而為.腎小管間質纖維化的發病機制提供理論和實驗依據，並為其防治研究提供新的靶點，而.miR-382也可望成為診斷腎小管間質病變及評估預後的新指標。
結題摘要
腎小管間質纖維化是所有慢性腎臟疾病的共同病理特徵，而腎小管間質纖維化的發生與腎小管上皮細胞EMT轉化及腎間質細胞MET逆轉的實時調節密切關聯。微小RNA（microRNAs,miRNAs）是近年來發現的參與基因調節的重要分子，但其在腎小管間質纖維化發病過程中對EMT-MET的平衡調控作用目前尚未明了。項目組前期工作發現miR-382在體外TGF-β1誘導的HK2細胞建立的 EMT模型高表達，本項目擬進一步明確miR-382在腎小管間質纖維化中的作用機制。採用體外轉染技術和突變試驗，明確miR-382豐度對HK2細胞極性的影響，並驗證miR-382及其預測靶基因HSPD1的互補配對關係；同時在體內實驗中，於小鼠左輸尿管結紮前半小時內和術後24小時，分別經尾靜脈注射鎖核苷酸修飾的anti-miR-382寡核苷酸，觀察miR-382豐度對梗阻側腎臟的病變的影響；臨床驗證：收集12例IgA腎病患者的腎穿刺標本，其中6例伴有中至重度腎小管間質纖維化，另6例無明顯小管間質病變，結合原位雜交和免疫組化結果進一步驗證miR-382/HSPD1與腎小管間質病變的相關性。結果顯示：體外轉染技術和突變試驗證實HSPD1為miR-382對應的新的、直接靶基因。腎小管上皮細胞發生EMT或腎小管間質出現纖維化病變時伴隨miR-382豐度上調，下調miR-382表達可部分逆轉TGF-β1誘導的腎小管上皮細胞EMT，並減輕腎小管間質纖維化。UUO梗阻側腎組織和IgA腎病患者腎活檢組織miR-382豐度下調，HSPD1蛋白水平表達上調。在腎小管間質纖維化發病過程中，HSPD1水平的下調可能造成細胞抗氧化應激能力下降。結論：HSPD1是miR-382的直接靶基因。作為促纖維化microRNAs之一的miR-382，在人類及小鼠腎小管間質纖維化病變時表達上調，其靶基因HSPD1表達下調並導致相應的抗氧化應激能力減弱可能是miR-382參與CKD進展的重要機制之一。
