《miR-200b對炎症性腸病腸上皮屏障功能的調控及分子機制》是依託上海交通大學，由陳穎偉擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：miR-200b對炎症性腸病腸上皮屏障功能的調控及分子機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：陳穎偉
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
腸上皮屏障損傷是炎症性腸病（IBD）的重要發病機制，保護腸上皮屏障功能可改善IBD預後。課題組前期工作發現，IBD受損腸黏膜組織中miR-200b表達下降，過表達miR-200b則可促進腸上皮細胞增殖，抑制轉化生長因子（TGF-β1）誘導的上皮-間質轉分化（EMT），提示miR-200b可通過跨細胞途徑改善腸上皮屏障功能。為進一步研究miR-200b對細胞旁途徑介導的IBD腸上皮屏障功能的調控作用及其分子機制，我們擬開展如下工作：①研究IBD時miR-200b與腸上皮細胞間緊密連線相關基因的表達及關聯性；②在細胞與動物模型上驗證miR-200b對IBD腸上皮屏障功能的改善作用；③探討miR-200b-肌球蛋白輕鏈激酶（MLCK）信號通路在腸上皮屏障功能調控中的作用。項目完成可補充和完善IBD腸上皮屏障功能損傷的分子機制，為尋求可能的分子靶點奠定理論基礎。
結題摘要
本課題研究發現，miR-200b在IBD腸上皮分化及屏障功能調控中發揮著不可或缺的作用，其機制與促進腸上皮細胞增殖、抑制腸上皮細胞EMT過程、調控靶基因MLCK表達、抑制緊密連線蛋白丟失有關，從而分別通過跨上皮途徑和細胞旁途徑影響腸道上皮通透性，改善腸上皮屏障功能。現總結如下：1.活動期IBD患者miR-200b表達明顯下調，與腸上皮標誌E鈣黏蛋白明顯下調和腸上皮細胞增殖凋亡失衡呈明顯正相關；2. TGF-β誘導的腸上皮-間質轉換細胞模型中，miR-200b表達受抑與E-鈣粘蛋白表達下調明顯相關，TGF-β刺激使上皮細胞之間連線鬆散甚至消失，而外源給予miR-200b可顯著改善腸上皮緊密連線功能減輕屏障損傷；3.在TNF-α誘導的腸黏膜屏障損傷細胞模型中，過表達下調的miR-200b可明顯改善TNF-α造成的跨膜電阻抗的下降，降低腸上皮細胞通透性，一方面靶向調控MLCK抑制MLCK/P-MLC信號通路來修復TNFα造成的腸上皮緊密連線損傷，另一方面靶向調控c-JUN抑制JNK、c-JUN/AP-1信號通路減少趨化因子IL-8的成熟和分泌；4.在以TNF-α模擬構建的IBD腸上皮屏障損傷細胞模型中，自噬降解過程受抑是導致緊密連線蛋白Claudin-2上調和腸屏障損傷的重要原因，該過程可能與溶酶體酸性環境破壞相關，而mTOR抑制劑PP242可激活自噬流，緩解上述Claudin-2和上皮屏障功能的改變，提示mTOR通路及下游自噬可能成為IBD治療新靶點；5.在以LPS模擬構建的IBD腸上皮細胞損傷模型中，TLR4-MyD88-ERK MAPK信號通路的異常活化激活mTOR，並通過進一步活化NFκB通路聯合抑制下游自噬進程，加劇IBD腸上皮細胞炎性細胞因子的分泌和氧化應激損傷；6.自噬相關蛋白Atg16L1缺陷可引起P62在腸上皮細胞中聚集，並通過P38 MAPK信號通路促進IL-1β誘導的炎性細胞因子IL-8的表達增加。以上研究結果從miRNA調控腸上皮細胞旁途徑的新視角闡釋了炎症性腸病腸屏障損傷的機理，拓展了對炎症性腸病腸上皮屏障損傷的機制認識，靶向miR-200b可為炎症性腸病臨床干預策略提出新的見解。
