《miR-145調控B7-H1介導的免疫耐受在卵巢癌鉑類耐藥中作用研究》是依託廈門大學，由盛青松擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：miR-145調控B7-H1介導的免疫耐受在卵巢癌鉑類耐藥中作用研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：盛青松
- 依託單位：廈門大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
化療後存活的卵巢癌細胞常表現出更強的免疫抵抗及免疫逃逸能力。T淋巴細胞凋亡和失能是引起化療後腫瘤細胞免疫耐受的重要原因。申請者前期研究發現，順鉑能夠誘導卵巢癌耐順鉑細胞表達共刺激分子B7-H1，後者顯著促進T淋巴細胞凋亡; miR145是通過晶片篩選結合生物學信息分析獲得的在順鉑誘導的卵巢癌細胞中顯著下調的microRNA，對B7-H1表達可能存在轉錄後調控; 因此，我們推測，化療後存活的卵巢癌細胞免疫耐受增強與miR145下調導致B7-H1蛋白表達增加進而誘導T細胞失能有關。本研究擬以卵巢癌耐藥細胞為研究目標，綜合利用基因轉染、qPCR、螢光酶素檢測、T淋巴細胞凋亡檢測及荷瘤小鼠等方法，探討miR145對B7-H1的轉錄後調控機制及其對卵巢癌細胞誘導T淋巴細胞失能的影響。闡明miR145在卵巢癌耐藥細胞表達B7-H1及免疫耐受中的作用和分子機制，為腫瘤鉑類耐藥提供新的認識和作用靶點。
結題摘要
順鉑化療後存活的人卵巢癌細胞獲得更強的免疫逃逸能力是其產生化療耐藥的重要原因。我們前期發現，順鉑能夠誘導卵巢癌細胞株表達共刺激分子B7-H1，促進T淋巴細胞凋亡。 miR145是我們通過晶片篩選獲得的在順鉑作用後的卵巢癌細胞中顯著下調的microRNA。經Real-time PCR和Western-blot實驗從mRNA水平和蛋白水平確認miR145對B7-H1表達具有負性調控作用。ELISA實驗顯示miR145下調的卵巢癌細胞培養上清中分泌型B7-H1含量顯著增多。流式細胞術分析顯著miR145下調的卵巢癌細胞培養上清能夠誘導T淋巴細胞凋亡。然而雙螢光素酶報告基因檢測顯示，miR145對B7-H1的負性調控為非靶向作用。深入探索發現，miR145能夠靶向負性調控核轉錄因子c-Myc，進而調控B7-H1表達。在A2780cis卵巢癌細胞的荷瘤小鼠實驗中發現，上調miR145小鼠腫瘤體積顯著減小且生存期顯著延長。此外，在臨床樣本的Real-time PCR檢測中發現miR-145表達水平與卵巢癌惡性程度呈負相關；免疫組化組織晶片分析顯示B7-H1表達水平與卵巢上皮癌惡性程度呈正相關，B7-H1高表達者順鉑化療後亦復發。復發卵巢癌組織中miR145與B7-H1的表達水平亦呈負性相關。我們的工作首次提出miR145-c-Myc-B7-H1調控方式在卵巢癌鉑類耐藥及免疫耐受進程中的作用，為揭示卵巢癌鉑類耐藥機制提出了新認識和潛在作用靶點。上述工作已撰寫題MiR145 regulating B7-H1 in cisplatin resistance of ovarian carcinoma via the c-Myc transcription factor 的文章，投至Biochemical and Biophysical Research Communications雜誌，目前處於under view階段。
