《miR-145在TR4調控前列腺癌CD133陽性細胞化療耐藥中的作用機制》是依託蘇州大學，由陽東榮擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：miR-145在TR4調控前列腺癌CD133陽性細胞化療耐藥中的作用機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：陽東榮
- 依託單位：蘇州大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
去勢抵抗性前列腺癌的化療耐藥是臨床面臨的難題之一。目前認為腫瘤組織中存在的CD133陽性細胞及miRNA表達異常是腫瘤化療耐藥的重要因素。我們的前期研究發現，在前列腺癌C4-2 細胞株的CD133陽性細胞中，睪丸孤核受體4(TR4) 通過調控Oct4的表達調節細胞的化療耐藥性。同時TR4還可抑制C4-2 CD133細胞中miR-145的表達水平。而miR-145表達降低可使Oct4的表達升高。因此，在CD133陽性前列腺癌細胞中，TR4可能還通過抑制miR-145的表達，間接影響Oct4的表達而發揮化療耐藥功能。為此，需要在此基礎上，採用多種分子生物學技術，從細胞水平及動物水平進一步證實這一作用機制。從而進一步明確TR4在前列腺癌CD133陽性細胞中的化療耐藥機制。
結題摘要
TR4可調控去勢抵抗性前列腺癌（CRPC）CD133+細胞中OCT4的表達，進而影響CRPC的化療耐藥，但是否有其他機制參與尚不明確。我們進行了如下研究:(1):採用生物信息學方法分析引起CRPC的miRNA及與CPRC化療抵抗相關miRNA的數量，對兩者中均有差異表達的miRNA經定量PCR驗證；(2): 過表達或抑制CRPC細胞及CD133+細胞中TR4的表達，採用定量PCR、Western Blot 檢測感興趣的miR145、OCT4的變化；Luciferase、chip試驗等驗證miR145是否受TR4調控，OCT4是否受miR145的調控；(3):檢測C4-2與C4-2 CD133+細胞在抑制TR4表達後對多西他賽敏感性變化；(4):改變不同前列腺癌細胞株中miR145的表達對OCT4表達的影響；(5):分別或聯合抑制CRPC細胞中TR4與miR-145後，檢測CRPC細胞化療敏感性。(6):製作動物移植瘤模型，給予多西他賽，體內驗證(5);(7):TR4影響前列腺癌進展的其他機制。結果:(1):生物信息學分析及定量PCR結果提示CRPC中，有4個miRNA參與化療耐藥。其中miR145是感興趣的目標;(2):CRPC及CD133+細胞中，TR4高表達而miR145低表達，miR-145受TR4的反向調控，OCT4受miR145調控;(3):抑制C4-2與C4-2 CD133+細胞TR4表達，細胞對多西他賽敏感性增加;(4):不同CRPC細胞中，miR145表達增加，則OCT4表達下降。(5):抑制TR4後，PC-3、C4-2、DU145對多西他賽的敏感性增而抑制miR-145，細胞對多西他賽的敏感性下降;(6):PC-3細胞製作的祼鼠移植瘤獲得同樣結果。以上研究結果證實，在去勢抵抗性前列腺癌及前列腺癌CD133陽性細胞中，miR145受TR4調控，進而調控OCT4，影響CRPC及CD133+細胞對化療的敏感性。這是CRPC化療耐藥的新機制，也圓滿完成了課題任務。此外，我們還發現TR4通過調控CD133+前列腺癌細胞中EZ2H的表達水平，影響轉移相關基因表達，從而促進CRPC的浸潤與轉移，這是TR4參與前列腺癌轉移的新機制；TR4還可影響CARMEN的表達，而CARMEN在前列癌中的作用不明，為進一步研究CARMEN在CRPC細胞的作用提供新基礎。
