《mRNA差別顯示法分離電針有效與無效鼠相關基因》是徐國恆為項目負責人，北京大學為依託單位的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：mRNA差別顯示法分離電針有效與無效鼠相關基因
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人 ：徐國恆
- 批准號：39600192
- 申請代碼：H3118
- 負責人職稱：教授
- 研究期限：1997-01-01至1999-12-31
- 支持經費：10(萬元)
項目摘要
提取電針有效鼠和無效鼠中腦導水管周圍灰質RNA為模板進行DDRT-PCR，用銀染方法顯示差異條帶，回收差異條帶並進行二次PCR獲得19條差異條帶，其中9條來自電針有效鼠，10條來自電針無效鼠。將其中18條差異條帶分別克隆至PCR21TA載體，轉染DH5α細胞，提取重組質粒。用EcoRI酶切鑑定插入片段為正確的克隆，並用Northern點雜交方法從18個克隆中篩選出3個陽性克隆分別是H1、H4和L3。將這3個片段進行測序分析發現H1為177bp、H4為225bp、L3為336bp。用BLAST方式與基因序列資料庫進行同源比較，發現與現有基因無明顯同源性，均為新的基因，已登錄在Genbank，登錄號分別是AF141361（H1）、AF141360（H4）、AF141362、（L3）。
