iNPC定向分化為膽鹼能神經元的實驗研究

《iNPC定向分化為膽鹼能神經元的實驗研究》是依託同濟大學，由鄧曉蓓擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：iNPC定向分化為膽鹼能神經元的實驗研究
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：鄧曉蓓
• 依託單位：同濟大學

中文摘要

針對當前人們關注的誘導性神經幹細胞（iNPCs）治療阿爾茨海默病（AD）的科學問題，本項目擬通過最佳化轉錄因子組合，將皮膚成纖維細胞轉分化為iNPCs。進一步探討在小分子化合物的作用下， iNPCs在體內、外分化為膽鹼能神經元的效率。本研究針對iNPCs分化膽鹼能神經元的影響因素，通過不同轉錄因子組合（決定細胞命運轉錄因子和膽鹼能神經元特異性轉錄因子組合）轉分化Nestin-EGFP小鼠皮膚成纖維細胞為iNPCs，進而篩選最佳轉錄因子組合。利用分子生物學、電生理技術等驗證iNPCs的功能特點和與原代神經幹細胞的相似性。進一步篩選小分子化合物，以提高iNPCs分化為膽鹼能神經元的效率。將Qtracker565標記iNPCs，定點注射在C57BL/6小鼠海馬區，明確iNPCs在體內定向分化為膽鹼能神經元的影響因素。該研究為iNPCs治療阿爾茨海默病提供了科學基礎，也具有重要的研究意義和臨床價值。

結題摘要

針對當前人們關注的誘導性神經幹細胞治療阿爾茨海默病的科學問題，本項目擬通過轉錄因子最佳化組合誘導皮膚成纖維細胞轉分化為神經前體細胞，進一步探討其分化為膽鹼能神經元的效率和體內功能。本研究建立在轉分化的基礎上，通過轉錄因子最佳化組合（Sox2、Brn2、FoxG1），轉分化Nestin-EGFP小鼠皮膚成纖維細胞，獲得具有前腦特徵的神經前體細胞。進一步，iNPC中過表達膽鹼能神經元分化相關基因lhx8（l3）基因，能夠顯著提高iNPC向膽鹼能神經元的分化效率，降低GABA神經元的分化效率。我們繼續通過最佳化轉錄因子組合，將l3與其它轉錄因子Sox2、Brn2不同的組合感染入小鼠皮膚成纖維細胞中，已成功誘導不同轉錄因子組合的神經前體細胞。擴大培養細胞後，比較不同細胞系的增殖能力、NPC特異基因表達水平，表明誘導性神經前體細胞具有NPC相關特性。然而，iNPCs分化為星形膠質細胞、少突膠質細胞的分化特異性基因表達水平，較野生型神經前體細胞顯著降低。目前，正在進行iNPCs的神經元分化實驗，需進一步檢測其分化為膽鹼能神經元的效率。該研究為誘導性神經前體細胞治療阿爾茨海默病提供了科學基礎，也具有重要的研究意義和臨床價值。