GAPDH或G3PDH是甘油醛-3-磷酸脫氫酶（ glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase ）的英文縮寫。GAPDH是糖酵解反應中的一個酶，廣泛分布於各種組織中的細胞。
基本介紹
- 中文名：甘油醛-3-磷酸脫氫酶
- 外文名： glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase
- 簡稱：GAPDH
- 性質：糖酵解反應中的一個酶
- 分子量：146 kDa
- 細胞分布：廣泛分布於各種組織中
- 套用：蛋白印跡法 內參
基本介紹,參數,
基本介紹
該酶是糖酵解反應中的一個酶，由4個30－40kDa的亞基組成，分子量146kDa。該酶基因為管家（house keeping）基因，幾乎在所有組織中都高水平表達，在同種細胞或者組織中的蛋白質表達量一般是恆定的，且不受含有的部分識別位點、佛波脂等的誘導物質的影響而保持恆定，故被廣泛用作抽提total RNA，poly(A)+ RNA，Western blot等實驗操作的標準化的內參。常用的內參有，ACTB（β-actin、β-肌動蛋白）、GAPDH或18S等。目的是在於避免RNA定量誤差、加樣誤差以及各PCR反應體系中擴增效率不均一、各孔間的溫差等所造成的誤差、這些都是管家基因，在各個組織中的表達量相對穩定，其中18S同整個基因譜有關（負責裝配），它在總RNA中占的比例最高。
GAPDH結構圖
GAPDH結構圖
轉染了GAPDH siRNA.jpg
轉染了GAPDH siRNA的Hela細胞轉染了GAPDH相關siRNA的HeLa細胞在轉染後48小時後不斷增殖。 紅：被標記的siRNA；藍：被染色的細胞核；綠色：GAPDH蛋白。
陰性對照（scrambled siRNA）的導入（左）對GAPDH蛋白的表達沒有影響，不過若轉入一個以GAPDH（右）為靶標的siRNA，則會導致GAPDH蛋白表達水平的急劇下降。
參數
GAPDH（甘油醛-3-磷酸脫氫酶）是參與糖酵解的一種關鍵酶，由4個30-40kDa的亞基組成，分子量146kDa，檢測條帶大約在36kDa。GAPDH基因幾乎在所有組織中都高水平表達，廣泛用作Western blot蛋白質標準化的內參。因為GAPDH 作為管家基因在同種細胞或者組織中的蛋白質表達量一般是恆定的，因此在使用GAPDH內參抗體時，將每個樣品測得的目的蛋白含量與本樣品的GAPDH含量相除，得到每個樣品目的蛋白的相對含量，然後才進行樣品與樣品之間的比較。
