fura-2是細胞內鈣離子（Ca2+）的特異性螢光指示劑，由Grynkiewicz等於1985年合成．
基本介紹
- 外文名：fura-2
- 類別：指示劑
- 提出者：Grynkiewicz
- 提出時間：1985年
簡介,fura-2特點,套用,
簡介
fura-2
分子式見圖.
它能特異性地與Ca2+結合，結合比例為1：1同時Fura-2可發出螢光，結合Ca2+後的最大激發波長從結合前的380nm移向340nm，其發射螢光強度與結合Ca2+的濃度有定量關係。由於Fura-2是極性大的酸性化合物，無法進入細胞內，為此在其負性基團上結合了乙醯氧甲酯，使其成為Fura-2/AM．既增加了酯溶性又消除了負電荷，使之容易進入細胞內，在細胞內，Fura-2/AM被酯酶水解成Fura-2後可與胞漿游離Ca2+可逆性結合．但Fura-2/AM在細胞外並不能與Ca2+結合，所以檢測的340nm激發下的發射螢光強度可定量的確定[Ca2+]i及其動態變化。
fura-2特點
(a) 螢光強度大，敏感度高，且所用劑量小，對細胞內環境影響小；
(b) Fura-2與Ca結合後的激發光譜高峰有較大的漂移(從380nm移至340nm)，且Fura-2測定[Ca2+]i基本不受細胞密度及螢光劑濃度的影響，能校正胞漿的Ca2+濃度,易於識別與計算；
(c) 對鈣，鎂的選擇性高；
(d) 自身螢光小；
(e) Fura-2與Ca結合的解離常數(Kd) 37℃為224,其標準曲線具有良好的線性，其對Ca2+的測定範圍為10-5～10-82+mol.L-1，且能測定短暫而快速的Ca濃度的變化。
套用
它主要套用於兩個方面，一是將Fura-2直接注入單個細胞內，用螢光顯微鏡測定其Ca2+濃度，該方法準確可靠，還可觀察到細胞內不同部位Ca2+濃度的變化，但需要昂貴的儀器設備；二是測定細胞懸液、組織塊或貼壁細胞的細胞內Ca2+。
Fura 2對Quin 2的螢光特性做了改進。1 μM Fura 2結合後的信號強度相當於30 μM的Quin 2結合後的信號強度。這樣就保證在實驗中可以使用比Quin 2的濃度低得多的Fura 2指示劑。Fura 2是一種使用最廣泛的比率測量的鈣螢光指示劑。目前適用於Fura 2實驗的設備有很多，它特別適合於用數字成像顯微鏡來檢測。它比Indo 1更不易受到光褪色作用的影響。細胞形狀的改變有時候會影響340 nm和380 nm的螢光比率，比如，平滑肌收縮會同時引起這些波長的螢光信號強度的減小。另外，對於血管來說，340 nm的信號強度的增加會因為血管收縮而趨向於變小，而380 nm信號強度的減小會因為血管收縮而變大。Fura 2-AM是Fura 2的一種乙醯甲酯衍生物，通過培養，能夠輕易地負載到細胞中。
產品來源；上海浩然生物技術有限公司
