anti-POV

anti-POV是一種脊髓灰質炎病毒抗體,用於脊髓灰質炎病毒的血清學檢查。

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概述

脊髓灰質炎病毒(polioviurs)可引起脊髓灰質炎,又名小兒麻痹症。該病毒有3個血清型。脊髓灰質炎病毒的實驗室診斷方法有病毒的分離鑑定、分子生物學方法和血清學診斷方法。病毒的分離鑑定雖是常用方法,但一般的臨床實驗室難以進行。分子生物學方法主要是PCR和核酸雜交。血清學診斷方法有中和試驗、間接免疫螢光試驗、反向間接血凝試驗和ELISA方法等。

別名

脊髓灰質炎病毒抗體

anti-POV的醫學檢查

檢查名稱

anti-POV

分類

血清學檢查 > 病毒的血清學檢查

anti-POV的測定原理

病毒感染機體後,機體會產生針對該病毒的中和抗體。當含中和抗體的血清與病毒結合後,就使其失去感染細胞的能力,接種細胞後,細胞就不會被感染產生病變。據此可以檢測出體內是否含有針對該病毒的中和抗體及其效價。

試劑

螢光顯微鏡;帶孔載玻片;甘油;2/萬伊文思藍;Eagle液;小牛血清,0.01mol/L pH7.4 PBS;Vero或Hep-2細胞;脊灰Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型參考株;異硫氰酸螢光素(FITC)標記的脊灰Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型型特異的單克隆抗體。

操作方法

(1)抗原片(靶細胞)製備,將脊髓灰質炎病人標本20%大便懸液,分別編號,各號分別感染Vero或Hep-2單層細胞各1瓶,待CPE出現++~+++時,用刮取或酶胰消化法,收集細胞懸液於10ml離心管中,1000r/min,離心5min,PBS洗3次,最後懸浮至0.3~0.4ml PBS中,使細胞濃度為1~2×106個細胞/ml,取帶孔載玻片,滴片,使每孔內含細胞均為5×104~1×105,每份標本(包括參考毒株)各塗3孔。對照細胞3孔。
(2)塗好的抗原片,置空氣中自然乾燥,冷丙酮固定10min,可立刻使用或-20~70℃保存備用。
(3)用2/萬伊文思藍,按工作濃度分別稀釋Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ型FITC-McAb。每份標本分別滴加Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型FITC-McAb各1孔,置濕盒中,37℃孵育30min後用PBS洗3次,50%PBS甘油封片,螢光顯微鏡讀結果。
(4)判定標準:應考慮螢光細胞的數目分布及亮度。螢光細胞多而閃亮++++;螢光細胞多而亮+++,螢光細胞亮度一般++;螢光細胞灰暗或朦朧+。
(5)凡那個型別螢光染色細胞出現++或以上者即判為該型病毒陽性,若有兩個型或兩個以上均出現螢光陽性染色細胞即為混合感染,對照成立。

正常值

陰性。

化驗結果臨床意義

中和抗體為IgG型,出現較晚。脊髓灰質炎病毒感染後,在發病後2~3周達高峰,1~2年內逐漸下降,持續時間很長,一直保持一定水平。恢復期與急性期抗體效價有4倍或4倍以上增長,可診斷。

附註

中和試驗特異性高,但操作繁瑣費時,一般臨床實驗室做起來有困難。

相關疾病

脊髓灰質炎

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