《YAP基因調控Wnt/β-catenin通路影響口腔上皮細胞癌變的機制研究》是依託上海交通大學，由張雷擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：YAP基因調控Wnt/β-catenin通路影響口腔上皮細胞癌變的機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：張雷
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
課題組前期建立了口腔上皮細胞體外癌變模型，採用基因晶片技術獲得了癌變前後的差異表達基因。經過對差異表達基因的分析和驗證，將研究聚焦到YAP基因上。本課題擬套用此癌變模型進一步研究YAP基因表達變化對永生化細胞惡性轉化的影響和對口腔癌細胞株成瘤能力的影響，模擬腫瘤發生的早期階段，並在口腔白斑和鱗癌組織標本中進一步驗證，深入探討YAP基因在口腔鱗癌發生髮展過程中的作用，及其與口腔鱗癌早期診斷、預後評估的相關性。並進一步探討YAP基因在口腔上皮癌變過程中調控Wnt/β-catenin信號通路的具體機制。以期為口腔鱗癌發病機制研究、早期診斷、預後評估提供新的思路和依據。
結題摘要
課題組前期建立了口腔上皮細胞體外癌變模型，經過對差異表達基因的分析和驗證，將研究聚焦到YAP基因上。本課題旨在深入探討YAP基因在口腔鱗癌發生髮展過程中的作用，及其與口腔鱗癌早期診斷、預後評估的相關性。並進一步探討YAP基因在口腔上皮癌變過程中調控Wnt/β-catenin信號通路的具體機制。以期為口腔鱗癌發病機制研究、早期診斷、預後評估提供新的思路和依據。 研究發現YAP基因在口腔白斑、口腔鱗癌癌組織表達增高，與淋巴轉移、腫瘤分化程度有一定的相關性，且胞核中YAP蛋白的表達高低與患者的5年生存率有明顯的相關性。Fra-1蛋白在口腔鱗癌標本中高表達，與淋巴轉移有一定的相關性，且在腫瘤的侵襲前緣，Fra-1的表達相對集中。這些結果表明：YAP基因與口腔癌的轉移有明顯的相關性，可以作為預測腫瘤轉移風險高低的分子指標之一；核中YAP蛋白表達有望作為預測口腔癌患者生存率的指標之一。 YAP基因沉默以後，口腔癌細胞生長變緩慢，克隆形成力降低，細胞侵襲、遷移能力變差，裸鼠皮下成瘤能力下降；再次被過表達後，細胞生長、克隆形成、細胞侵襲、遷移能力基本恢復，裸鼠皮下成瘤能力部分恢復。這提示YAP對口腔癌細胞的生長、侵襲、轉移起重要的作用。此外，YAP過表達後β-catenin表達也升高，而其下游的cyclinD1、CD44、Fra-1和c-myc基因表達也隨之升高。相反，在YAP基因沉默後，β-catenin表達也降低，而其下游的cyclinD1、CD44、Fra-1和c-myc基因表達也隨之降低。這些結果表明，YAP可能通過調節β-catenin的表達，從而調節其下游相關基因，對腫瘤細胞的生長、侵襲、轉移能力起調控作用。 YAP基因沉默和再次過表達後，β-catenin的mRNA表達水平變化不大，提示YAP不是直接調節β-catenin的mRNA表達。而Axin蛋白在YAP基因被干擾後表達明顯下降，提示YAP可能通過調節Axin的表達，從而調節β-catenin的穩定性，使β-catenin降解減少，表達豐度增加，從而調控Wnt/β-catenin通路。 另外，利用腫瘤轉移相關qPCR晶片對YAP基因潛在的下游基因進行篩選，發現YAP可能通過調節WAVE1對口腔癌的轉移發生作用。這為深入研究YAP基因調節腫瘤轉移的具體機制提供新的研究方向，也是我們下一步研究重點。
