《YAP在胰腺癌發生髮展中功能及TRAF6對YAP調控作用的研究》是依託復旦大學，由戎葉飛擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：YAP在胰腺癌發生髮展中功能及TRAF6對YAP調控作用的研究
- 依託單位：復旦大學
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：戎葉飛
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
胰腺癌惡性程度極高，其發病率與死亡率幾乎相等，針對其發生髮展機制的研究是目前胰腺癌研究領域的熱點。既往研究提示Hippo信號通路在腫瘤發生髮展中具有重要作用，而YAP是Hippo信號通路重要成員。我們前期工作發現在胰腺癌組織標本中高表達YAP，且高表達YAP與患者預後呈負相關；同時我們發現胰腺癌組織中高表達TRAF6，而TRAF6是多種信號通路的調控因子，前期研究提示TRFA6蛋白可以與YAP蛋白相結合，因而我們推測TRAF6蛋白可能對Hippo-YAP信號通路進行調控。因此在本申請項目中，我們將利用細胞系、動物模型、臨床樣本等，通過質粒轉染、siRNA干擾等技術進一步明確YAP在胰腺癌發生髮展中的功能，並探討TRAF6對Hippo-YAP信號通路的調控作用及機制。項目研究獲得結果將進一步揭示胰腺癌發生髮展的分子機制，並豐富對Hippo信號通路的認識，為胰腺癌治療提供新思路及治療靶點。
結題摘要
胰腺癌惡性程度極高，其發病率與死亡率幾乎相等，針對其發生髮展機制的研究是目前胰腺癌研究領域的熱點。既往研究提示Hippo信號通路在腫瘤發生髮展中具有重要作用，而YAP是Hippo信號通路重要成員。我們前期工作發現在胰腺癌組織標本中高表達YAP，且高表達YAP與患者預後呈負相關；同時我們發現胰腺癌組織中高表達TRAF6，而TRAF6是多種信號通路的調控因子，我們推測TRAF6蛋白可能對Hippo-YAP信號通路進行調控。在本項目研究中我們主要研究內容為TRAF6在胰腺癌侵襲遷移中作用，以及TRAF6對YAP信號通路的調控作用機制。結果提示TRAF6在胰腺癌細胞系及組織標本中高表達，且過表達TRAF6能夠促進胰腺癌細胞的增殖及遷移；而下調TRAF6表達能夠抑制胰腺癌細胞的增殖及遷移。進一步我們研究了TRAF6對YAP信號通路的調控作用。結果提示下調TRAF6表達可以顯著抑制胰腺癌細胞YAP表達，同時能夠抑制YAP信號通路下游靶基因Cyr61、CyclinE及CTGF的表達。而TRAF6促進胰腺癌細胞系的遷移及克隆形成是通過YAP完成。在TRAF6過表達胰腺癌細胞系內下調YAP表達可以去除TRAF6過表達促進胰腺癌遷移作用。此外沉默YAP表達可以損害過表達TRAF6促進胰腺癌非錨定生長能力。為進一步研究TRAF6對YAP信號通路作用位點，我們研究了TRAF6與YAP上游分子MST間關係。通過免疫螢光實驗發現，TRAF6與MST蛋白在胰腺癌細胞內具有共同定位；而GST pull down實驗發現，胰腺癌細胞內GST-TRAF6能夠與內源性的MST形成複合物；此外免疫共沉澱實驗同樣證實內源性TRAF6能夠與MST相互作用。文獻報導TRAF6具有泛素化酶作用，我們進一步研究證實TRAF6能夠促進MST蛋白的講解。通過GEPIA資料庫搜尋，結果提示在胰腺癌標本MST表達與胰腺癌患者預後呈負相關，而MST表達與TRAF6表達呈負相關。綜合上述結果，我們提出TRAF6通過促進MST蛋白降解，進而激活YAP信號通路促進胰腺癌細胞的增殖及遷移。本研究結果豐富了對腫瘤重要信號通路Hippo-YAP的認識，同時能夠為胰腺癌的治療提供新的治療靶點。
