《YAP在應力調控生長板軟骨細胞肥大分化中的作用及機制》是依託蘇州大學，由楊開祥擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：YAP在應力調控生長板軟骨細胞肥大分化中的作用及機制
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：楊開祥
- 依託單位：蘇州大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
應力對生長板的形成和發育至關重要，而力學對生長板軟骨細胞的調控機制以及相應力學傳導過程尚不明確。申請者在前期研究中發現YAP (Yes-associated protein)參與生長板軟骨細胞力學信號傳導過程，推測YAP在應力調控生長板正常發育和異常病變中發揮重要作用。本項目首先體外分離培養生長板軟骨細胞；然後研究應力對生長板軟骨細胞內YAP活性的調控作用；同時觀察和檢測FAK（Focal adhesion kinase）、RhoA、F-actin和LINC(linker of nucleoskeleton and cytoskeleton) complex的表達；並採用激動劑或拮抗劑，研究這些可能的信號傳導因子和YAP之間的關係；最後我們研究YAP在力學調控生長板軟骨細胞肥大分化中的作用。對生長板力學信號轉導過程的認識越深，越能為早期干預生長板異常病變提供新方法。
結題摘要
應力對生長板的形成和發育至關重要，而力學對生長板軟骨細胞的調控機制以及相應力學傳導過程尚不明確。YAP（yes-associated protein）和LINC complex是重要的力學信號轉導因子。本項目首先體外分離培養生長板軟骨細胞，並將其與骨髓間充幹細胞比較，觀察兩者成軟骨分化能力;然後應力載入予以體外力學干預，觀察和檢測干預前後細胞骨架以及生長板軟骨細胞肥大分化相關基因COL X和Ihh的表達；對可能的信號傳導通路，予以拮抗劑或RNAi技術；最後採用新的評分量表來明確惡病質分期。通過上述研究內容的開展，得出以下結果：1.體外分離培養的生長板軟骨細胞增殖能力強於骨髓間充質幹細胞，單獨培養的生長板軟骨細胞組和共培養組成軟骨分化能力要強於單獨培養的骨髓間充質幹細胞組。2.短時間的應力能激活生長板軟骨細胞內FAK、RhoA和YAP蛋白，並促進細胞骨架F-actin聚集，以及下調細胞肥大分化相關基因COL X和Ihh的表達。LINC complex抑制劑siSUN可以抑制應力對FAK、RhoA和YAP蛋白的活化、細胞骨架F-actin的聚集，以及COL X和Ihh的表達減少。3.長時間的應力能激活mTORC2、AKT和PKCα的磷酸化，以及上調COL X和Ihh的表達，PKCα抑制劑GO-6976或siRictor能抑制應力對COL X和Ihh的上調作用。4.新型分期評分量表充分驗證了惡病質嚴重程度與肌肉減少症之間的關係。上述研究表明三維共培養生長板軟骨細胞和骨髓間充質幹細胞可作為生長板修復和再生的理想種子細胞。YAP、LINC complex和mTORC2信號通路參與了力學信號傳導過程，同時結果顯示新型惡病質評分量表將有助於我們明確YAP和肌肉減少症的關係。
