Y染色體微缺失分子檢測指南
前言
在精子發生障礙引起的男性不育患者中，Y染色體微缺失的發生率僅次於Klinefelter’s syndrome(克氏綜合徵)，是居於第二位的遺傳因素。Y染色體微缺失已成為男性不育患者的常規檢查項目。歐洲男科學協會和歐洲分子遺傳實驗質控協作網為提高診斷質量，在1999年和2004年先後發布了第一版和第二版Y染色體微缺失分子檢測指南。經過多年的臨床實踐證明該指南準確、靈敏和易於操作。2005年4月在上海召開了中國人Y染色體微缺失分子診斷的研討會，會議在歐洲指南的基礎上起草了符合目前我國男性不育診療現狀，並反應最新生物技術發展的中國人Y染色體微缺失分子檢測指南。
實驗指南
Y染色體上存在影響精子發生的無精子因子（AZF）區域，進一步可分為AZFa,AZFb和AZFc三個區域。Y染色體微缺失分子檢測實驗利用多重聚合酶鏈反應（multiplex－PCR）特異性擴增Y染色體AZF區域的序列標籤位點（STS），擴增產物用電泳或雜交等方法進行檢測。
PCR擴增後檢測方法
PCR擴增產物最常見的檢測方法是瓊脂糖凝膠電泳，本指南也予以推薦。由於每個泳道有5條擴增產物，若其分子量相差太小，電泳時間將延長至幾個小時甚至過夜。為了提高效率，選擇引物時注意各產物條帶之間的長度差別是否足夠大，電泳時間控制在1時以內比較合適。
PCR產物經毛細管電泳方法檢測，靈敏度更高，檢測更快速，更準確，易於實驗自動化。期待該方法的配套Y染色體微缺失檢測試劑能夠取代目前的傳統檢測方法。
Y染色體微缺失分子檢測的臨床意義
Y染色體微缺失遺傳型與表型的關係已進行了大量研究，對臨床有非常好的指導意義。
AZFa、AZFb和AZFc三個區域全部缺失的患者，100%表現為無精子症。不可能通過任何手段從睪丸中獲得精子。
AZFa區域整段缺失通常導致唯支持細胞綜合徵（SCO綜合徵），臨床表現為無精子症。如果診斷為整段AZFa區域缺失，若想從睪丸中獲得精子進行ICSI已不大可能。
AZFb和AZFb+c整段缺失的典型睪丸組織學特徵是SCO綜合徵或生精阻滯。與AZFa區域整段缺失的情況類似，這種病人在睪丸穿刺時也找不到精子。因此，不推薦給這類病人施行ICSI。
AZFc缺失的臨床和睪丸組織學表型多種多樣。一般說來，AZFc缺失患者尚殘存精子生成能力。AZFc缺失見於無精子症或嚴重少精子症患者，罕見情況下，也可以在自然狀態下遺傳給其男性後代。在無精子症患者中，AZFc缺失者通過TESE獲得精子的機會要大得多，也可以進行ICSI受孕。但這些患者的男性子代將是AZFc缺失的攜帶者。
另外，有研究發現AZFc區域缺失的少精子症患者，其精子數目有進行性下降的趨勢，最後發展為無精子症。因此，對AZFc區域缺失的少精子症患者,應及早進行治療或將其精液進行冷凍保存。
