《Wnt5a調控鼻咽癌轉移的細胞結構、受體分析和信號通路》是依託中山大學，由錢朝南擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：Wnt5a調控鼻咽癌轉移的細胞結構、受體分析和信號通路
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：錢朝南
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
鼻咽癌作為華南及東南亞地區的高發惡性腫瘤，其遠處轉移是治療失敗的主要原因。我們基於自創的鼻咽癌淋巴結轉移模型，通過高通量的基因表達譜分析，首次發現Wnt5a 的表達水平與鼻咽癌細胞轉移能力呈正相關。但是Wnt5a調控鼻咽癌轉移的分子機制未明。我們的預實驗顯示，鼻咽癌淋巴結和肝轉移灶中Wnt5a 表達水平比原發灶顯著升高。我們因此提出了Wnt5a與細胞膜受體相結合之後調控鼻咽癌細胞的遷移、侵襲和轉移能力的科學假設。通過套用裸小鼠淋巴結轉移模型以及液相色譜與串聯質譜等技術，本項目將進一步收集Wnt5a上調鼻咽癌轉移的系列證據、鑑定Wnt5a在鼻咽癌細胞通過Cdc42調控絲狀偽足的形成、識別Wnt5a在鼻咽癌細胞的膜受體、明確Wnt5a的信號通路以及該通路上的關鍵分子。本項目的完成將闡明Wnt5a調控鼻咽癌轉移的分子機理、為預測患者的預後以及防治鼻咽癌的遠處轉移提供新的靶點。
結題摘要
腫瘤轉移、腫瘤細胞獲得幹細胞特性等惡性行為的分子機制尚未充分明了。 我們建立了鼻咽癌不同轉移能力的細胞克隆以及體內轉移的動物模型。用高通量的基因晶片技術分析，發現 WNT5A 和 SPINK6在高轉移細胞株里有較高的表達水平。在人鼻咽癌轉移到灶里WNT5A的蛋白表達水平均高於鼻咽癌原發灶。WNT5A可上調EMT標誌物是 Vimentin。用220例人鼻咽癌組織進行免疫組化染色發現WNT5A與Vimentin共同高表達的患者，其無病生存和無復發生存率均降低了。體外和體內實驗均證明WNT5A 可促使腫瘤細胞獲得幹細胞特性，其信號通路主要是 PKC 和 ERK。WNT5A 在鼻咽癌細胞的受體主要是FZD6，其在鼻咽癌的高水平表達與患者預後不良有關。 我們發現SPINK6的高表達是鼻咽癌患者總生存、無病生存、無轉移生存的獨立預後因素。經一系列功能研究，證實了SPINK6可以通過自分泌和旁分泌的方式促進鼻咽癌細胞的遷移、侵襲、轉移。SPINK6也可上調EMT。更重要的是，我們首次發現SPINK6是EGFR的一個新配體。 在比較鼻咽癌組織與鼻咽非癌組織的差異時，我們發現uPAR信號通路在鼻咽癌組織中的上調最有意義。隨後又證實了uPAR/JAK/STAT 信號通路可以促進鼻咽癌細胞的生長、遷移、侵襲、轉移。從三個表達譜基因晶片資料庫中，還發現PBK的表達水平顯著升高。一系列的功能實驗證實PBK對於維持鼻咽癌細胞的惡性行為起到了重要作用。 在肝癌細胞的形成和增殖過程中，需要合成大量的核酸。我們發現肝細胞癌的癌細胞可以通過c-Myc 介導的切換機制，使得果糖激酶 KHK-A的表達升高，進而促進了戊糖磷酸途徑的核酸合成。 我們先前已經發現IL-8 可以促進鼻咽癌細胞的惡性行為。此次我們進一步發現IL-8通過促進 E-cadherin 啟動子區域的甲基化來實現對 E-cadherin表達水平的抑制作用。 事實上，腫瘤細胞內部也存在一些抑制其惡性行為的機制。RNA結合蛋白QKI-5 就可以通過直接結合到RASA1的mRNA 上並使其更加穩定，從而實現了RASA1抑制Ras-MAPK 信號通路，阻止細胞的增殖。另一方面，RASSF6可以促進腫瘤細胞的細胞周期阻滯。RASSF6還可以上調鼻咽癌細胞對治療的敏感性。 整個項目在SCI雜誌發表論著17篇，綜述3篇，申請專利4項，培養研究生6名。
