《WASH的磷酸化修飾對NK細胞功能調控的研究》是依託鄭州大學，由黃嵐擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：WASH的磷酸化修飾對NK細胞功能調控的研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：黃嵐
- 依託單位：鄭州大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
NK細胞通過分泌殺傷性顆粒清除病毒感染的細胞或腫瘤細胞，在機體的早期免疫防禦中發揮關鍵性作用；深入了解NK細胞的活化和殺傷機制對於相關疾病的治療具有重大意義。基於WASP家族蛋白作為主要的細胞骨架調節蛋白在多種淋巴細胞中發揮顯著效應的理論基礎，本項目首次探究WASP家族新成員WASH在NK細胞中的重要作用及其調控機制。初步的結果提示WASH參與了NK細胞對靶細胞的殺傷，因此推測WASH調節NK細胞內細胞骨架的重組，從而影響免疫突觸的形成，細胞毒性顆粒的極化、運輸和釋放。更重要的是，我們發現WASH具有酪氨酸磷酸化修飾現象，擬將確定特異的磷酸化位點、相應的酪氨酸蛋白激酶和磷酸酶，並揭示WASH蛋白磷酸化修飾及其對NK細胞功能調控的分子機制。結合動物模型和臨床材料分析，本研究可望揭示NK細胞殺傷靶細胞的新機制，並為相關疾病的臨床治療提供新的思路。
結題摘要
自然殺傷（Natural Killer，NK）細胞是重要的固有免疫細胞和機體免疫防禦的第一道防線。細胞骨架調節蛋白在淋巴細胞功能調控中發揮重要作用，本項目主要研究了細胞骨架調節蛋白WASP家族新成員WASH在NK細胞中的作用和分子機制。利用不同的實驗模型，我們首先證實了WASH在NK細胞殺傷靶細胞中的重要作用，闡明了WASH蛋白影響NK細胞內殺傷性顆粒的極化和釋放。我們還發現了WASH蛋白的磷酸化修飾現象，鑑定出NK細胞中Src家族的Lck激酶能調控WASH蛋白的磷酸化。利用分子生物學實驗，我們鑑定出WASH分子的第141位酪氨酸是主要的磷酸化位點並在NK細胞殺傷靶細胞中發揮重要作用。這些研究揭示了NK 細胞殺傷腫瘤細胞的新機制，可能為治療相關臨床疾病提供新的線索。細胞骨架調節蛋白還可能直接參與腫瘤細胞的重要生物學功能。食管癌是一種常見的消化道腫瘤，進展快預後差，發病有明顯的地域特色。本項目中，我們還發現WASH在食管癌患者腫瘤組織中高表達並與疾病進展和臨床預後相關。利用多株人食管癌細胞系模型，我們驗證了WASH在食管癌細胞中的表達，還發現WASH在食管癌幹細胞中高表達。通過抑制和過表達WASH的方法，我們證實了WASH的表達對食管癌幹細胞至關重要，並能影響腫瘤在小鼠體內的生長。在分子機制方面，我們篩選並鑑定出WASH主要是通過影響食管癌細胞分泌IL-8來調控腫瘤幹細胞。此外，我們闡明了食管癌細胞中miR-637下調是導致WASH蛋白表達升高的關鍵分子機制。通過臨床資料分析證實了食管癌組織中miR-637和WASH表達水平呈負相關，可能成為判斷食管癌患者預後的新指標。本項目從免疫細胞和腫瘤細胞的角度，闡明了WASH蛋白的重要作用和相關分子機制，具有潛在的臨床套用價值。
