VDRL,性病研究實驗室實驗(venereal disease research laboratory test)的英文縮寫,是檢測梅毒螺旋體的一種方法。
基本介紹
- 中文名:性病研究實驗室實驗
- 外文名:venereal disease research laboratory test
- 用途:檢測梅毒螺旋體
- 發明人:美國Pangborn
實驗介紹,抗原血清試驗,VDRL玻片試驗,
實驗介紹
美國Pangborn等發現一種性病研究實驗室抗原(VDRL),是從牛心肌中提取的心磷脂,適量加入膽固醇及卵磷脂以提高敏感性,通常稱這種抗原為心擬脂抗原。VDRL試驗屬於微量玻片法,是唯一推薦用於檢測腦脊液反應素的試驗,對診斷神經梅毒具有重要價值,可作定量及定 性試驗,操作簡單,試劑及對照血清已標準化,費用低。但對一期梅毒敏感性不高。
抗原血清試驗
梅毒螺旋體一旦感染人體,人體迅速對被損害的宿主細胞以及梅毒螺旋體細胞表面所釋放的類脂物
質作出免疫應答,在3~4 周產生抗類脂抗原的抗體(反應素)。這些抗體主要是IgG 和IgM 型混合
抗體。非梅毒螺旋體抗原試驗是使用心磷脂、卵磷脂及膽固醇作為抗原的絮狀凝集試驗。反應素與
心磷脂形成抗原抗體反應,卵磷脂可加強心磷脂的抗原性,膽固醇可增強抗原的敏感性。心磷脂、
卵磷脂遇水形成膠體溶液,膽固醇遇水形成結晶。當抗原與抗體(反應素)混合發生反應時,後者
即粘附膠體微粒的周圍,形成疏水性薄膜。由於搖動、碰撞,使顆粒與顆粒互相粘附而形成肉眼可
見的顆粒凝集和沉澱,即為陽性反應。如遇到非梅毒血清,因體液中的白蛋白多於球蛋白,而白蛋
白對膠體顆粒有保護作用,形成親水性薄膜,即使同樣搖動、碰撞,由於抗原顆粒周圍沒有粘附免
疫球蛋白的作用,不能形成較大顆粒,無肉眼可見的凝集和沉澱,因此為陰性反應。VDRL、USR、
RPR 和TRUST 等試驗均為此類試驗,它們所採用的抗原成分相同,敏感性和特異性基本相似。
VDRL玻片試驗
1.材料:a. VDRL 試劑盒:含VDRL 抗原(0.5mL);VDRL 緩衝液,pH6.0±0.1,其配方為中性福馬林0.5 mL,
Na2HPO4 0.037g,KH2PO4 0.17g,NaCl 10.0g,蒸餾水1000mL;標準針頭(60±1 滴/mL),直徑14mm
漆圈玻片;VDRL 試驗結果圖片。
b. 其他:0.85% NaCl 溶液(等滲鹽水);可調水平旋轉器。
B1.2.2 VDRL 抗原配製方法:
a. 吸取0.3mL VDRL 緩衝液置30mL 小瓶;
b. 吸取0.3mL VDRL 抗原迅速滴入小瓶內VDRL 緩衝液中(約4 秒鐘),隨後搖動10 秒鐘,使之混
勻;
c. 立即加2.4mL VDRL 緩衝液,蓋上瓶蓋,來回顛倒搖動小瓶10 秒鐘約30 次,即為VDRL 抗原,
此抗原只能用1 天。
定性試驗
a. 血清標本需 56℃滅活30 分鐘備用;
b. 吸取 0.05mL 血清放入玻片圈內,將血清塗開至整個圈內;
c. 用標準針頭加入 1 滴抗原;
d. 將玻片置旋轉器上搖動 4 min,180±5 次/min,立即置10×10 倍顯微鏡下觀察。
定量試驗
經 VDRL 定性試驗為陽性、弱陽性,可疑反應或陰性但臨床懷疑為梅毒者,需做定量試驗,前
者需明確抗體滴度,後者為排除“前帶現象”。
a. 在反應板 1~8 孔各加等滲鹽水0.05 mL;
b. 吸取 0.05 mL 血清標本(血清已滅活)置第1 孔與等滲鹽水混勻,吸取0.05 mL 稀釋液至第2 孔
混勻,再吸取0.05 mL 至第3 孔,如此連續稀釋至第8 孔,棄0.05 mL 稀釋液。稀釋度為原倍、1:2、
1:4、1:8、1:16、1:32、1:64、1:128,必要時可稀釋至更高倍數。
c. 每個稀釋度加入抗原 1 滴;
d. 旋轉速度和時間同定性試驗。
A2.1.2.5結果
大或中等大小的絮狀物,液體清亮: 3+~4+ 強陽性反應;
絮狀物較小,液體較清亮: 2+ 陽性反應;
絮狀物較小,均勻分布,液體混濁 1+ 弱陽性反應;
抗原顆粒稍粗,無凝集 ± 可疑;
抗原顆粒均勻,針狀細小: – 陰性反應。