《USP9x去泛素化β-catenin促進肺癌細胞TRAIL耐受的機制研究》是依託武漢大學，由謝叢華擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：USP9x去泛素化β-catenin促進肺癌細胞TRAIL耐受的機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：謝叢華
- 依託單位：武漢大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
抑制型受體OPG、DcR1與DcR2與腫瘤細胞發生TRAIL耐受密切相關，但其表達調控的機制尚不明確。我們前期實驗發現：USP9X可以通過去泛素化穩定β-catenin的水平，β-catenin能調控抑制型受體OPG、DcR1與DcR2的轉錄表達。因此，本項目擬以肺癌為研究對象，首先檢測肺癌組織中USP9X/β-catenin與抑制型受體OPG、DcR1、DcR2表達的相關性；其次探討核內β-catenin/TCF/LEF轉錄複合體對抑制型受體表達的影響；再從蛋白質去泛素化修飾水平研究USP9X穩定β-catenin並促其入核，以深入闡釋β-catenin調控抑制型受體表達的上游機制。本研究分別從組織/細胞系/分子/動物水平闡釋USP9x/β-catenin相互作用在調控上述受體表達和TRAIL耐受中的關鍵作用，對逆轉肺癌細胞的TRAIL耐受具有重要的理論意義。
結題摘要
TRAIL具有特異性誘導腫瘤細胞發生凋亡，而對正常細胞沒有明顯毒性的特點，其配體——受體信號通路近年來成為腫瘤靶向治療的研究熱點。多種腫瘤細胞對TRAIL的耐受制約了其臨床上的廣泛套用。因此，弄清TRAIL耐受的分子機制，尋找能逆轉其耐受的分子靶點，克服耐藥將是它們套用於臨床的關鍵。經過一序列研究，我們發現： （1）在NSCLC組織中 USP9x表達明顯高於正常肺組織, 其高表達預示患者總生存率較差,更易轉移,分期更晚。提示USP9x可能成為衡量患者預後的分子標誌。（2）USP9x通過去泛素化調節β-catenin在細胞漿內的聚集，胞漿內β-catenin聚集到一定程度後向核內轉運，與轉錄因子TCF/LEF相結合，從而影響抑制型受體的表達水平，最終影響 TRAIL敏感性。WP1130抑制A549細胞內USP9x的表達，可增敏TRAIL。 （3）在NSCLC組織中β-catenin與OPG表達明顯高於正常肺組織 ，且兩者的表達水平具有相關性。在腫瘤進展過程中，血清OPG的表達水平逐漸升高。 （4）沉默MYO7A可以抑制RIP1的表達,促進DISC的形成，進而促進凋亡，增強NSCLC細胞的TRAIL敏感性。 （5）天花粉蛋白聯合TRAIL，通過上調H1299細胞中DR4/5的表達水平和促進其膜轉運，從而逆轉原發性耐藥。 （6）構建TRAIL繼發性耐藥模型H460-TR。發現H460-TR中凋亡拮抗因子cFLIP和Mcl-1的表達升高。經TRAIL誘導後DR4/5向膜表面轉運障礙是繼發耐藥的重要原因。基因表達譜和外顯子測序結果顯示原發耐藥和繼發耐藥均涉及到多靶點、多基因的改變。 上述結果揭示了TRAIL原發和繼發耐藥的相關分子機制，並為提高TRAIL敏感性提供了一些可借鑑的策略。
