《UHRF1抑制TIMP家族基因轉錄及促進乳腺癌轉移的研究》是依託復旦大學，由金偉擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：UHRF1抑制TIMP家族基因轉錄及促進乳腺癌轉移的研究
- 依託單位：復旦大學
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：金偉
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
MMP家族與乳腺癌轉移密切相關，TIMP家族能夠特異性抑制MMP家族的活性,從而抑制乳腺癌轉移。本課題預實驗發現UHRF1能夠特異性結合於TIMP家族4個基因啟動子上並抑制它們的轉錄，進而提高MMP家族蛋白水平並促進乳腺癌的肺轉移。本課題擬深入揭示UHRF1調控TIMP家族基因轉錄、促進乳腺癌轉移的機制，找出UHRF1及其轉錄複合物在TIMP家族基因啟動子上的精確作用位點及其對DNA甲基化、組蛋白密碼的影響；探索UHRF1與TIMP、MMP家族表達、乳腺癌轉移、病人生存率等指標之間的臨床規律；發現UHRF1促進乳腺癌轉移的其它可能分子途徑。.本課題有助於分析轉錄因子與DNA之間的相互作用以及組蛋白密碼對基因轉錄的影響，屬於生命科學研究中的前沿領域；有助於全面揭示UHRF1促進乳腺癌轉移的分子機制；有助於發現乳腺癌轉移過程中新的分子靶點，對於指導臨床治療乳腺癌具有實際的套用價值。
結題摘要
三陰性乳腺癌是一種進展快，預後差的乳腺癌，其發生髮展機制仍有眾多問題尚未解決。本研究中，我們通過對親本三陰性乳腺癌細胞MDA-MB-231及其衍生的高轉移細胞MDA-MB-231HM進行基因組學對比分析，發現轉錄因子UHRF1在高轉移細胞MDA-MB-231HM細胞呈現高表達。進一步研究發現UHRF1在乳腺癌組織中的表達明顯高於正常組織中的表達，通過Kaplan-Meier plotter 分析發現高表達UHRF1的患者的無病生存時間相比於低表達UHRF1的患者的無病時間減少。通過體外細胞功能學實驗以及裸鼠動物模型，均證實過表達UHRF1能顯著促進三陰性乳腺癌轉移能力；而沉默UHRF1可以抑制三陰性乳腺癌的轉移能力。採用ChIP-sequencing技術發現UHRF1能夠結合於TIMP1，TIMP2的啟動子上；進一步的研究發現，UHRF1會結合到TIMP1，TIMP2基因的啟動子上並抑制它們的轉錄與功能，UHRF1調控TIMP1，TIMP2的轉錄能力遠大於對TIMP3，TIMP4的作用。UHRF1通過抑制TIMP家族的表達從而影響到下游通路MMP家族的活性，最終促進乳腺癌轉移。 本研究還發現KLF17為UHRF1下游調控的一個靶基因，在臨床標本中， UHRF1與KLF17的表達呈負相關。細胞實驗中發現UHRF1負向調控KLF17表達，下調UHRF1細胞後進一步下調KLF17能夠逆轉sh-UHRF1引起的細胞增殖能力降低；同時Transwell實驗證明下調KLF17能夠逆轉sh-UHRF1導致的遷移能力下降。這些實驗說明UHRF1促進細胞增殖能力是通過下調KLF17表達實現的。進一步實驗發現UHRF1下調KLF17的表達可以通過增加其啟動子區的CpG 島甲基化實現。 本研究首次發現並證實，UHRF1是促進乳腺癌發生髮展的重要因子，UHRF1可以通過調控TIMP家族的表達從而影響到下游通路MMP家族的活性，最終促進乳腺癌轉移；UHRF1也可通過調控KLF17的表達從而影響到乳腺癌細胞增殖和遷移。
