《TSP1蛋白保護視神經的分子機制及其活性短肽的篩選》是依託中山大學，由莊菁擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：TSP1蛋白保護視神經的分子機制及其活性短肽的篩選
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：莊菁
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
視神經損傷變性的防治一直是眼科研究領域的熱點，骨髓基質幹細胞分泌的細胞間基質對神經損傷的修復具有顯著的作用。我們前期研究證實：骨髓基質幹細胞分泌的TSP1蛋白能促進視網膜神經細胞存活、軸突的生長以及突觸的形成，隨後也有相關報導與我們的結論一致。然而，TSP1蛋白結構複雜，它包括了5個不同活性區域，導致N、C末端功能不一致，目前人們對它保護神經作用的活性區域及其分子機制並不清楚。因此，本課題將通過構建TSP1中5個結構域的表達載體、轉染視網膜神經節細胞等實驗，揭示TSP1蛋白中具有保護視神經作用的活性區域；通過免疫共沉澱、蛋白質分離純化以及質譜分析等方法，探討TSP1保護視神經的分子機制；採用短肽微陣列篩選TSP1蛋白中保護神經元的活性小肽段，為將來視神經疾病的治療提供依據。該研究將闡明TSP1蛋白保護視神經的分子機制，為神經退行性疾病、神經系統損傷防治提供新的基因靶點。
結題摘要
視神經損傷變性的防治一直是眼科研究領域的熱點。TSP1蛋白能促進視網膜神經細胞存活、軸突的生長以及突觸的形成，然而，TSP1蛋白結構複雜，目前對它保護神經作用的活性區域及其分子機制並不清楚。因此，本課題探討了TSP1保護視神經的分子機制；篩選了TSP-1蛋白中保護神經元的活性短肽片段，為將來視神經疾病的治療提供依據。主要研究成果包括以下3方面：（1）採用MTT方法分析了TSP1蛋白中的21條短肽，其中發現兩條對視網膜神經元具有保護作用， 5條對膠質瘤有抑制作用，但對神經元沒有作用；（2）TSP1保護神經元的分子機制方面：我們發現TSP-1一方面能促進神經元的存活，提高神經因子Synaptophysin的表達，同時能有效促進受損神經元的DNA的修復；（3）驗證了TSP1是保護視神經細胞及抑制視網膜母細胞瘤的有效因子，並且揭示了其分子機制：a.TSP1在視網膜母細胞瘤中表達沉默，外源性TSP1能夠抑制RB細胞活性；b.證明了TSP1可以引起RB細胞DNA損傷，並影響細胞非同源末端結合(NHEJ-C)的DNA修復；並且發現Rb1基因突變參與由TSP1引起的RB細胞DNA損傷；c.體外體內驗證了TSP1對視網膜神經細胞的保護作用和對RB的抑制作用。該研究將闡明TSP-1蛋白保護視神經的分子機制，為神經退行性疾病、視網膜母細胞瘤及神經系統損傷防治提供新的基因靶點。
