《TREM-2受體調節豬繁殖與呼吸綜合徵病毒複製的分子機制》是依託中山大學，由郭春和擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：TREM-2受體調節豬繁殖與呼吸綜合徵病毒複製的分子機制
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：郭春和
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
研究表明CD163受體是PRRSV感染必需受體，敲除該基因豬可以抵抗病毒感染，但調控該受體表達的分子機制有待深入挖掘。本項目組發現PRRSV感染PAMs後會促進TREM-2受體表達；利用LPS刺激PAMs後，明顯抑制TREM-2表達，同時激活酶ADAM17並抑制了CD163表達，結果PRRSV複製受到顯著抑制。在此基礎上，本項目擬通過TREM-2干擾和過表達等試驗研究該受體與PRRSV複製關係；然後分析該受體是否通過 TLR信號通路調節細胞因子表達和ADAM17活性，進而調控CD163表達和PRRSV複製，揭示TREM-2受體調節該病毒複製的分子機制；最後通過動物實驗，進一步驗證TREM-2受體對PRRSV複製作用。預期研究結果不僅可確證TREM-2受體可調節PRRSV複製，還可為篩選PRRSV易感基因及抗病育種奠定基礎，也有助於進一步理解該病毒致病機理。
結題摘要
TREM-2作為抗炎症受體，負調節先天性免疫應答，TREM-2主要在樹突狀細胞和巨噬細胞上表達，而這些細胞正是PRRSV的靶細胞。基於此，我們研究TREM-2在PRRSV感染中的作用。我們發現，豬肺泡巨噬細胞感染PRRSV後，TREM-2表達量顯著上調，干擾TREM-2抑制病毒複製，而TREM-2過表達促進病毒複製。進一步發現，TREM-2的胞質尾區與PRRSV NSP2互作促進病毒感染。分析TREM-2調節PRRSV機制為：TREM-2下調激活 PI3K/NF-κB信號通路，進而使促炎細胞因子和I型干擾素上調錶達，由於這些因子上調錶達，ADAM17被激活，從而切割CD163，最終導致PRRSV感染的抑制。此外，我們原核表達了TREM-2的胞外域部分，並發現胞外域部分通過抑制病毒吸附抑制病毒複製，這種抑制病毒吸附，可能是由於TREM-2胞外域競爭性與病毒表面糖蛋白結合導致的。最後，通過活體實驗，採集豬體內不同器官組織，發現肺、淋巴結、脾臟等免疫組織中TREM-2表達量最高，仔豬PRRSV攻毒後，免疫組織肺和淋巴結中的TREM-2表達量顯著升高，與細胞體外結果一致。以上研究揭示了TREM-2通過炎症應答調節PRRSV感染，TREM-2可作為預防治療PRRSV感染的重要靶點，同時本研究進一步解釋了PRRSV致病機理。另外，我們還發現，外源添加原核表達的TREM-2胞外域部分通過促進Heparanase酶活性，切割病毒受體硫酸乙醯肝素（HS），進而抑制病毒吸附，最終抑制病毒複製。同時，在病毒感染晚期，病毒會激活Heparanase，以切割HS受體，抑制胞內複製的病毒粒子與細胞表面HS相互黏連，最終促進病毒釋放，由此可知Heparanase上調錶達可促進病毒釋放。基於此，我們篩選到靶向Heparanase酶活性的鋅離子載體Pyrithione (PT). PT通過抑制NF-kappaB通路，進而抑制Heparanase酶活性，從而抑制病毒釋放，最終抑制病毒複製。PT可作為一種有效的抗PRRSV製劑。
