《TRAIL在動脈粥樣硬化發生髮展中作用機制的研究》是依託山東大學，由王艷擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：TRAIL在動脈粥樣硬化發生髮展中作用機制的研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：王艷
- 依託單位：山東大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體（TRAIL）對腫瘤細胞有凋亡作用而對正常細胞無細胞毒作用，因其高選擇性，在腫瘤領域備受關注，近年有研究表明TRAIL參與了動脈粥樣硬化（AS），但在其中的作用和機制知之甚少。本研究採用apoE敲基因鼠，在單純高脂飼養同期對照下，在斑塊形成的不同階段通過過表達（轉染攜帶TRAIL基因的腺病毒）及抑制表達（埋藏式微量滲透泵泵入TRAIL阻斷劑）正反兩個方面研究驗證。並進一步在TRAIL/apoE雙基因敲除鼠中深入研究。超聲動態觀察各組斑塊進展;病理檢查斑塊脂核大小、纖維帽厚度等;免疫組化、RT-PCR、westen對TRAIL及炎性指標等進行定性定量分析，同時檢測血清學各項指標，以了解斑塊中TRAIL的作用以及干預前後斑塊變化並觀察這些變化是否與干預因素相關。並進一步通過體外實驗深入研究TRAIL誘導巨噬細胞凋亡泡沫化的作用機制，並篩選信號轉導通路上的關鍵分子。
結題摘要
在體內，我們用TRAIL 重組腺病毒載體的方法證實了TRAIL對晚期動脈硬化斑塊有減輕和穩定作用。 1.大體組織油紅O染色證實TRAIL過表達組主動脈斑塊的負荷明顯降低（P＜0.005）。為進一步驗證主動脈斑上的發現，我們進行了頸動脈套管實驗，8周后斑塊面積的超聲測量得到同樣結論---TRAIL腺病毒轉染後顯著降低了apoE-/-小鼠動脈粥樣硬化的發展和負荷。sDR5阻斷內源性TRAIL後，斑塊的負荷增加，從反方向驗證了TRAIL在動脈粥樣硬化發展中的作用。 2.篩選外周血CD4+T、CD8+T、NK、B細胞發現，隨著動脈粥樣硬化的發生，外周血CD4+T、CD8+T、NK表達TRAIL也隨之上調，其中以CD8+T和CD4+T最為顯著。 3. TRAIL腺病毒轉染後顯著增加了斑塊的平滑肌細胞的含量、增加了纖維帽的厚度，膠原的含量也有增加的趨勢，降低了斑塊內巨噬細胞的含量和脂質含量。總的易損指數降低，增加了斑塊的穩定性。 4.TRAIL可能是通過抑制炎症因子的表達和降低MMP家族成員的含量來實現穩定斑塊的作用。過表達TRAIL組，炎症因子ICAM、MCP-1 、IL-6、IL-18、TNF-a的表達降低，MMP-3、MMP-9、MMP-12的表達也降低。TRAIL穩定斑塊的另一作用機制可能是其選擇性凋亡的作用，在本實驗中，TRAIL增加了巨噬細胞的凋亡，但平滑肌細胞未見凋亡。檢測塊中凋亡通路的關鍵分子，其中促進凋亡的Bax、caspase8顯著增高，抑制凋亡的Bcl-2顯著升高。 5.我們意想不到的一個發現是TRAIL對早期動脈硬化斑塊和晚期動脈硬化斑塊存在相反作用。我們觀察到TRAIL在ApoE基因敲除小鼠中增加了早期斑塊的形成。這項發現文獻內尚沒有報導，因此其創新性和臨床意義非常明顯,其具體作用機制將是以後深入研究的方向。
