《TAT表面修飾的pH敏感NEP1-40納米水凝膠的研究》是依託中國人民解放軍第四軍醫大學，由徐瑞芬擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：TAT表面修飾的pH敏感NEP1-40納米水凝膠的研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：徐瑞芬
- 依託單位：中國人民解放軍第四軍醫大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
近年來，全球患有中樞神經系統（CNS）疾病的人數隨著人口老齡化的加據而逐年增加，主要抑制受損神經再生的基因-Nogo及 NgR是國內外研究熱點。NEP1-40作為NgR拮抗劑，具有高選擇性和有效性使其成為治療CNS疾病的新藥。如何跨越血腦屏障，使損傷區域達到有效治療濃度是研究的瓶頸問題。水凝膠納米粒具有環境回響性以及納米特性。本研究將採用超聲自組裝法製備平均粒徑100nm, 對pH敏感，即在pH 7.4穩定性高，隨pH降低直線性釋放NEP1-40，TAT表面修飾的納米水凝膠，真正實現缺血缺氧損傷區域靶向性、智慧型控制性釋藥。採用同位素標記技術、SPECT技術、高效液相色譜技術和組織內藥物濃度的測定等技術檢測納米水凝膠系統的生物學性質及跨膜性能，研究納米水凝膠對腦缺血再灌注損傷動物模型的保護作用，為開創治療中樞神經損傷新方法、新技術提供理論依據並為臨床套用奠定基礎。
結題摘要
血腦屏障（BBB）能夠防禦循環中的分子或免疫細胞進入中樞神經系統，以維護大腦的內穩態。BBB是有大腦特有的內皮細胞即緊密連線(TJ)形成的。以往的研究證實，人類免疫缺陷病毒1型(HIV-1)的Tat蛋白能夠改變TJ蛋白的表達。但是，改變的機理並沒有系統的研究。本研究選擇閉鎖蛋白為觀察目標，研究了HIV-1的Tat蛋白對人腦微血管內皮細胞(HBMECs)作用。Tat能夠降低閉鎖蛋白mRNA以及蛋白的表達水平，可能是由於抑制了RhoA 抑制劑C3 轉移酶和ROCK 抑制劑Y-27632的增加，同時Tat能夠誘導MMP-9的表達。小分子干擾RNA 沉寂MMP-9，可以減少可溶性閉鎖蛋白的濃度，HBMECs滲透性顯著增強。總之，HIV-1的Tat蛋白能夠破壞BBB的完整性，可能是通過抑制TJ的閉鎖蛋白的生成和組裝而產生作用。 殼聚糖(CS)/ 有機累托石(OREC)和海藻酸鈉(alginate , ALG)，按照不同的混合比例交聯，在Ca2+水溶液中包裹BSA而形成殼核結構的微球。光學顯微鏡和掃描電鏡觀察顯示，形成了殼核結構的微球。傅立葉變換光譜和X-射線能量分散顯示，OREC存在於微球中。小角X-射線衍射證實，CS鏈成功的插入OREC插層中。BSA的包封率和控釋檢測結果顯示，與純的CS/ALG形成的微球相比較，CO複合物所形成的微球藥物釋放率明顯提高，且無論是在pH 1.2 或7.4環境下，也無論是釋放初期或是持續釋放期。 成功製備了不同質量比的OREC-HTCC納米粒子，呈圓球形，均勻，平均粒徑約為30nm。紅外圖譜分析及納米粒子的能譜分析均證實，HTCC插入了OREC插層中，BSA成功地包裹入OREC-HTCC混合材料製備的納米微粒。加入OREC後，納米粒子的包封率及載藥量均明顯提高，但隨著加入量的增加，包封率及載藥量逐漸減少。BSA 的釋放有pH 回響性，在PBS 中BSA 的釋放較低pH環境下的釋放快，且HTCC：OREC為12:1時，控釋效果最好。
