Snf5介導的表觀修飾調控在MSC自發轉化中作用機制的研究

《Snf5介導的表觀修飾調控在MSC自發轉化中作用機制的研究》是依託武漢大學，由鄭勇擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：Snf5介導的表觀修飾調控在MSC自發轉化中作用機制的研究
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：鄭勇
• 依託單位：武漢大學

項目摘要

間充質幹細胞(mesenchymal stem cell，MSC)在體外長期培養過程中會發生自發轉化，轉化後的MSC在移植到裸鼠體內後具有形成纖維肉瘤和骨肉瘤的能力。本課題組及國外研究均發現：由表觀遺傳學修飾模式改變引起的p16INK4a基因的穩固沉默在MSC自發轉化中起重要作用。為分析p16INK4a基因的表觀遺傳修飾模式發生改變的機制，本項目以表觀遺傳修飾調控蛋白Snf5為切入點，採用RNAi和外源性表達的方法分析Snf5在p16INK4a基因的可調控抑制和穩固沉默模式相互轉換中的作用；通過高通量晶片技術分析該機制是否同時參與其它抑癌基因的表觀遺傳學沉默；並進一步探討恢復Snf5表達能否解除這種穩固沉默模式，甚至逆轉自發轉化的過程。該研究能為MSC自發轉化和腫瘤發生提供表觀遺傳學理論依據，在腫瘤的診斷和治療以及轉化醫學中具有重要的科學意義和潛在的套用價值。

結題摘要

間充質幹細胞(mesenchymal stem cell，MSC)在體外經過長期培養後會發生自發惡性轉化，這種轉化後的MSC在移植到裸鼠體內後具有形成肉瘤的能力。在本項目通過連續傳代培養的方式構建了MSC自發轉化模型，通過細胞計數和軟瓊脂集落形成實驗發現轉化後MSC具有更強的增殖能力並且獲得了非錨定生長的能力；為了研究p16INK4a基因穩固沉默的表觀遺傳學機制，通過染色質免疫共沉澱、亞硫酸鹽修飾後測序、RNA干擾和外源性表達等技術分析了Snf5與p16INK4a表達的關係，特別是Snf5對p16INK4a基因表觀遺傳學修飾模式的影響。在轉化後MSC，伴隨p16INK4a基因的表達降低，Snf5的表達明顯降低；通過對轉化後MSC外源性表達Snf5能夠增加p16INK4a基因H3k4me3的修飾水平，在一定程度上恢復p16INK4a的表達，但對p16INK4a基因的DNA高甲基化狀態沒有影響。通過對衰老前MSC干擾Snf5的表達後，p16INK4a基因的H3K4me3修飾水平降低，DNA甲基化水平升高，同時p16INK4a基因的表達降低；干擾Snf5後，衰老前MSC的增殖能力下降。這說明，Snf5在調控p16INK4a的表達中起重要作用，Snf5對p16INK4a的調控參與到MSC自發轉化過程，然而MSC自發轉化還需要其他分子機制的參與。