《Snail介導的腫瘤上皮-間質化誘導iTreg生成機制及其干預策略》是依託中山大學，由杜軍擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：Snail介導的腫瘤上皮-間質化誘導iTreg生成機制及其干預策略
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：杜軍
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
轉錄因子Snail是誘發腫瘤上皮-間質化（EMT）的關鍵分子。由其誘導發生EMT的腫瘤細胞具有遷徙移動表型，並可引發免疫抑制。憑藉這些特性，侵襲轉移中的腫瘤細胞可逃避宿主免疫系統的攻擊，加快轉移灶形成。適應性調節性T細胞（iTreg）是在外周組織誘生的一類具有放大免疫抑制功能的調節性T細胞（Treg）。iTreg在腫瘤免疫抑制各環節中的關鍵作用雖已被證實，但其在腫瘤轉移中的生成途徑及機制卻鮮為人知。最新研究報導及我們的前期研究均表明，經Snail誘發EMT的腫瘤細胞可迅速誘導iTreg生成，這為闡明iTreg在腫瘤轉移中的生成機制提供了新的線索。據此，本課題擬在前期構建的Snail誘導腫瘤細胞EMT以及由此誘生iTreg模型的基礎上，通過多個層面解析Snail介導腫瘤EMT與其誘生iTreg的內在機制，並評價相關干預措施對於改善腫瘤免疫療效，降低腫瘤轉移風險的有效性和可行性。
結題摘要
免疫系統的攻擊可以抑制原發部位的腫瘤生長，但卻無法阻止腫瘤局部侵襲和遠處轉移。由轉錄因子Snail驅動的腫瘤細胞EMT轉化所介導的腫瘤侵襲轉移總伴隨著免疫抑制現象。CD4+Treg細胞的負向調控免疫應答效應是導致腫瘤免疫抑制的重要機制之一。腫瘤細胞表面HLA蛋白表達量下降，會導致T細胞難以識別、殺傷腫瘤細胞，從而促進腫瘤細胞免疫逃逸。因此，深入闡明Snail介導的發生EMT轉化的腫瘤細胞誘導免疫抑制的機制，明確其在惡性腫瘤轉移中的病理意義，對於建立逆轉腫瘤免疫抑制狀態，阻止腫瘤轉移的有效措施至關重要。本研究通過構建穩定過表達和敲除Nodal黑色素瘤B16細胞株，探討Snail在Nodal誘導的B16細胞發生EMT過程中的作用及其調控機制。此外，通過採用B16-pldNodal或B16-shNodal細胞與 T細胞共培養模式，探討了Nodal在誘導iTreg轉化過程中的作用。其次，本研究深入探討了Snail介導腫瘤細胞發生EMT轉化同時，下調細胞表面HLA的現象及其機制。本研究的主要成果包括：1、成功建立穩定干擾Nodal及穩定過表達Nodal的B16細胞株，為進一步闡明Nodal在誘發腫瘤EMT及誘生iTreg中的作用提供了工具細胞。2、本課題研究發現B16-pldNodal呈現間質表型，具有促進體內黑色素瘤的肺轉移的特性；而B16-shNodal呈現上皮表型。 3、探討了Snail在Nodal促進B16細胞發生EMT過程中的關鍵作用。4、Nodal表達量越高的腫瘤細胞及其培養上清對iTreg細胞誘生能力越強。5、在APC存在的情況下，重組的小鼠Nodal蛋白能單獨或是協同TGF-β促進T細胞向iTreg細胞分化。6、基因晶片結果顯示，Nodal可能通過協同TGF-β上調T細胞表達多種免疫抑制性因子及通路蛋白，從而誘導iTreg細胞生成，並增強其免疫抑制功能。7、體內實驗證明，Nodal下調B16荷瘤小鼠淋巴結中的CD4+T細胞，而上調腫瘤引流淋巴結中CD4+ Fxop3+ T細胞。8、Snail介導TGF-β和EGF誘導PC3和DU145細胞發生EMT的同時，下調腫瘤細胞表面的HLA,以使腫瘤細胞逃避細胞毒T細胞介導的殺傷作用。以上研究為我們解除Snail介導的腫瘤細胞發生EMT轉化過程中所產生的腫瘤免疫耐受，進而阻止腫瘤轉移的免疫治療提供了一個新的思路。
