《Shh調節纖溶活性在腦梗死治療中的作用及機制研究》是依託西安交通大學，由李丹東擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：Shh調節纖溶活性在腦梗死治療中的作用及機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：李丹東
- 依託單位：西安交通大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
纖溶活性下降是腦梗死發生和發展的重要原因，t-PA和PAI-1表達比例失調是影響纖溶活性的關鍵。已知Shh能促進t-PA的表達，並抑制PAI-1的表達，其結果可激活內源性纖溶系統，加速血栓溶解。我們前期研究發現內源性纖溶系統激活能顯著減少梗死面積且不增加繼發性出血的風險，因此，此作用在腦梗死治療中有重要意義，但未見相關報導。目前對Shh調節t-PA和PAI-1表達的機制還不清楚，且調節機制獨立於Shh經典信號通路。我們結合以前的研究和我們的前期研究結果，提出LRP-1是重要的中繼蛋白，且存在由Shh/LRP-1/t-PA、PAI-1組成的新的信號通路。由此，本課題利用分子及細胞生物學，基因組學和免疫學等技術，綜合研究Shh調節腦梗死後t-PA和PAI-1表達的作用及意義，並探索Shh通過LRP-1調節t-PA和PAI-1表達的機制，以期為腦梗死的研究提供新的思路和治療靶點。
結題摘要
急性腦梗死嚴重威脅著人們的健康，影響腦梗死發生和發展的因素很多，其中纖溶系統起了關鍵作用。纖溶活性主要受t-PA和PAI-1的調節。已知Shh能促進t-PA的表達，並抑制PAI-1的表達，其結果可激活內源性纖溶系統，加速血栓溶解。目前對Shh調節t-PA和PAI-1表達的機制還不清楚，且調節機制獨立於Shh經典信號通路。我們提出LRP-1是重要的中繼蛋白，且存在由Shh/LRP-1/t-PA、PAI-1組成的新的信號通路的假說。為驗證我們的假設，我們設計了實驗一和實驗二。在實驗一中，我們用LRP-1的特異性抑制劑——受體相關蛋白（RAP）——抑制LRP-1的活性。結果顯示，RAP能從mRNA轉錄水平調節t-PA和PAI-1的表達並能明顯改善腦梗死預後，減少腦梗死面積，並抑制出血性轉化。此結果顯示了LRP-1通路在腦梗死治療中的價值，可作為腦梗死治療的新的潛在靶點。在實驗二中，我們在體外糖氧剝奪培養的人腦微血管內皮細胞（HBMEC）中觀察Shh和LRP-1的關係。結果提示Shh能調節OGD培養的HBMEC細胞表達LRP-1，且此作用不通過其經典通路。在此基礎上，我們進行了實驗三和實驗四。在實驗三中，我們用不同濃度的r-Shh對MCAO的大鼠行腦室注射，結果顯示，Shh能增加梗死區內t-PA的表達並抑制PAI-1的表達，提示Shh能促進腦梗死後的纖溶活性。同時我們還發現Shh能顯著改善腦梗死後腦代謝，減少梗死面積並改善預後。為研究Shh調節t-PA和PAI-1的機制，我們設計了實驗四。在實驗四中，我們在HBMEC細胞中研究其機制，結果發現LRP-1介導了Shh對t-PA和PAI-1的表達，且此作用獨立於Shh的經典通路。 由此，本課題利用分子及細胞生物學和免疫學等技術，綜合研究Shh調節腦梗死後t-PA和PAI-1表達的作用及意義，並探索Shh通過LRP-1調節t-PA和PAI-1表達的機制。闡述了Shh在腦梗死中的潛在治療作用，對其中機制的研究，我們探索並初步證明了可能存在的新信號通路，為腦梗死的研究提供了新的思路和治療靶點。
