《STAT/AKT/NFκB串話調控前列腺癌細胞化療耐藥通路的機制研究》是依託同濟大學，由許青擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：STAT/AKT/NFκB串話調控前列腺癌細胞化療耐藥通路的機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：許青
- 依託單位：同濟大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
化療耐藥是導致CRPC（去勢抵抗性前列腺癌）轉移的重要原因之一，針對相關作用通路進行干預成為趨勢，但具體靶點及通路間的調控機制仍不清楚。我們前期工作發現：Stat3/AKT串話對CRPC血管形成具有相互作用；Stat3/NFκB串話具調節細胞凋亡與增殖的作用；自建化療耐藥細胞株STAT3表達有變化。據此提出假設：Stat3/AKT/NFκB三條細胞信號傳導通路串話可能對CRPC化療耐藥具調控作用，而JAK是整個傳導環路中的關鍵。我們擬在自建化療耐藥細胞株基礎上，採用小分子JAK抑制劑阻斷及siRNA干擾的方式，通過Western Blot、EMSA、LCM等傳統方法及Nano Pro等新技術手段，證明JAK系Stat3/AKT/NFκB串話影響CRPC化療耐藥的關鍵靶點。本研究對闡明CRPC化療耐藥機制，揭示CRPC靶向治療規律具有重要意義，將為CRPC化療聯合靶向藥物治療提供新思路。
結題摘要
化療耐藥是導致包括去勢抵抗性前列腺癌等惡性腫瘤轉移的重要原因之一。我們前期工作發現：Stat3/AKT串話對CRPC血管形成具有相互作用；Stat3/NFκB串話具調節細胞凋亡與增殖的作用；自建化療耐藥細胞株STAT3表達有變化。我們認為Stat3/AKT/NFκB三條細胞信號傳導通路串話可能對CRPC化療耐藥具調控作用，而JAK是整個傳導環路中的關鍵。 通過Western blotting檢測STAT3, p-STAT3, E-cadherin, N-cadherin, survivin, and Bcl-xL的蛋白表達水平. 用共聚焦及RT-PCR檢測E-cadherin和N-cadherin表達情況.我們發現與常氧環境下相比，PC-3在低氧環境下對多西他賽更加耐受，並且伴有p-STAT3 和 N-cadherin 上調, 而 E-cadherin 下調. 通過用S3I-201抑制STAT3表達，阻斷了低氧誘導的EMT。低氧環境下，STAT3的上調促進幾種生存因子的表達（survivin和Bcl-xL）.並且STAT3抑制劑阻斷了低氧誘導的化療耐藥。因而在低氧環境下可能是通過上調STAT3促進化療耐受及EMT. 而抑制STAT3表達可能是逆轉低氧條件下化療耐受及EMT的靶點。 通過Western Blot技術檢測JAK2抑制劑和IL-6處理後的食管鱗癌細胞中STAT3、磷酸化STAT3、NF-κB p65、磷酸化NF-κB p65 和COX-2蛋白表達。用螢光定量RT-PCR法檢測STAT3和NF-κB siRNA轉染食管鱗癌細胞後STAT3、NF-κB及COX-2的mRNA水平。我們發現STAT3在三種食管鱗癌細胞系中不同程度地激活，阻斷JAK/STAT3信號通路可以抑制食管鱗癌的細胞生長、血管生成及調節細胞周期。同時，阻斷JAK/STAT3信號通路可以通過下調NF-κB p65的磷酸化、COX-2蛋白水平及IL-6的含量抑制食管鱗癌的腫瘤相關性炎症。另外，IL-6可以激活STAT3及NF-κB通路從而促進食管鱗癌的腫瘤相關性炎症及腫瘤生長。我們還發現COX-2是STAT3及NF-κB共同的下游基因。我們認為JAK/STAT3信號通路可以通過IL-6以及與NF-κB p65及COX-2的互動作用連線腫瘤相關性炎症與腫瘤生長，它有望成為惡性腫瘤預防及治療的靶點。
