《SPOP基因S119N突變參與肝母細胞瘤發生髮展的機制研究》是依託復旦大學，由董巋然擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：SPOP基因S119N突變參與肝母細胞瘤發生髮展的機制研究
- 依託單位：復旦大學
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：董巋然
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
肝母細胞瘤是兒童最常見的肝臟惡性腫瘤。目前，肝母細胞瘤的發生率逐年增加，預後較差，因此對其發生的分子機制認識具有重要意義。以往的研究主要聚焦在基因表達及功能異常（特別是Wnt信號通路）上。我們前期對肝母細胞瘤臨床樣品進行全外顯子組測序首次發現，SPOP基因上存在S119N突變。後續的實驗表明，該突變可影響肝母細胞瘤細胞系HepG2和HUH-6的生物學行為，提示SPOP基因S119N突變可能是新的致癌因素。基於此，本課題擬進一步套用蛋白組學、分子生物學及生物信息學等技術和方法，從細胞、動物及臨床三個水平，探討SPOP基因S119N突變的功能及其分子網路調控系統，明確SPOP基因S119N突變的分子調控機制及其在肝母細胞瘤發病中的作用；並探討其與臨床早期診斷及轉歸預測的關係，嘗試建立綜合指標評價體系，為疾病早期診斷、干預策略和防治模式提供新的視野和切入點。
結題摘要
研究背景：肝母細胞瘤（Hepatoblastoma，HB）是小兒最常見的肝臟惡性腫瘤，約占兒童肝臟原發惡性腫瘤總數的80%。肝母細胞瘤起病隱匿，早期診斷有一定的困難，因而其治療效果及預後並不理想。因此，闡明肝母細胞瘤的發病機制，從而進行早期診斷及新的治療方法的探索是亟待解決的具有實際意義的重要科學問題。斑點型鋅指結構蛋白（speckle-type POZ protein，SPOP），是泛素連線酶E3家族成員Cul-3與底物結合的橋樑蛋白，在蛋白質降解中起著重要作用。近年來，有研究顯示，SPOP的表達異常或突變在多種惡性腫瘤的發生髮展中具有重要的作用。然而在兒童腫瘤中，未見相關的報導。本課題組的前期實驗研究首次發現，肝母細胞瘤患者腫瘤組織SPOP基因上存在S119N突變。關於SPOP的S119N突變是否影響了肝母細胞瘤的發生髮展，還有待進一步的研究。研究內容：以過表達S119N突變的SPOP基因、野生型基因轉染肝母細胞瘤HepG2和HUH-6細胞株構建的穩轉株為模型，研究SPOP基因以及SPOP基因S119N突變在體內外對肝母細胞瘤發生髮展的影響及分子機制。研究結果：(1).SPOP基因抑制肝母細胞瘤細胞株的增殖、遷移和侵襲。SPOP基因S119N突變後，抑制作用消失，腫瘤增殖加快，遷移和侵襲能力增強。(2).SPOP基因促進肝母細胞瘤細胞株的凋亡。SPOP基因S119N突變後，細胞凋亡減少。(3).找到SPOP相關的信號通路PI3k-Akt通路和MAPK通路，經驗證，SPOP可以抑制這兩條通路的激活。(4).找出並確定SPOP基因與SPOP S119N突變基因的差異表達蛋白SLC7A1。經驗證，SLC7A1是由SPOP介導泛素化降解。SPOP基因S119N突變後，SLC7A1降解減少。SLC7A1促進精氨酸的攝取和代謝，從而促進肝母細胞瘤的增殖、遷移和侵襲。(5).SPOP基因在體內亦可以抑制肝母細胞瘤的增殖和轉移。研究意義：本課題發現SPOP在HB中表現為抑癌作用，SPOP S119N突變後抑癌作用消失。SPOP基因S119N突變後，SLC7A1降解減少，精氨酸跨膜轉運增加以及PI3k-Akt信號通路激活，從而增強HB細胞的生長、侵襲和轉移能力。本課題結果對以後HB的基因和靶向治療提供新的探索方向。
