SPARC在顱內動脈瘤發病中對動脈穩態的作用及機制研究

《SPARC在顱內動脈瘤發病中對動脈穩態的作用及機制研究》是依託山東大學，由朱樹幹擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：SPARC在顱內動脈瘤發病中對動脈穩態的作用及機制研究
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：朱樹幹
• 依託單位：山東大學

中文摘要

遺傳因素在IA病理髮生中的作用日益受到人們的重視。研究發現，動脈瘤中存在著富含半胱氨酸的酸性分泌糖蛋白（SPARC）過度表達的現象，提示SPARC在動脈瘤病理髮生中起重要的作用。本課題提出在動脈瘤形成過程中，血流動力學因素不斷造成動脈分叉處動脈壁內皮細胞等的微小損傷，而又由於遺傳性因素導致的SPARC過表達，通過調節動脈壁的細胞外基質各種因子，影響動脈穩態的平衡，導致血管壁退行性變，動脈瘤形成。本課題通過研究SPARC在患者動脈瘤術後標本及兔動脈瘤模型中的表達，套用外源性SPARC刺激體外培養的血管平滑肌細胞及RNA干擾技術抑制SPARC基因的表達，綜合套用RT-PCR、Western blot、Elisa、流式細胞儀、透射電鏡等多種研究方法，通過正反兩方面探討其與各種細胞外因子的相互作用，確定其在動脈瘤發病機制中的作用，期望其成為評估動脈瘤形成和破裂的有意義的生物學標誌物及潛在的治療靶點

結題摘要

一 研究背景： 顱內動脈瘤（IA）是自發性蛛網膜下腔出血的首要原因。 SPARC在組織重構、細胞增殖等病理生理過程中有重要作用。基質金屬酶（MMPs）是參與細胞外基質降解最重要的蛋白酶，它能降解已知的所有基質成分，是顱內動脈瘤發生髮展的關鍵一步。而MMP-2/-9是最為重要的基質金屬蛋白酶,與動脈瘤關係密切。探討SPARC、MMP-2/-9蛋白的表達與動脈瘤發生的相關性對研究動脈瘤形成機制有重要的臨床意義。 二 研究內容： 顱內動脈瘤為SPARC，MMP-2和MMP-9行HE和免疫組織化學染色。作為對照，willis動脈管壁同樣行免疫組化染色。所有標本包埋在石蠟中。為評價SPARC，MMP-2和MMP-9的表達水平，還用western-blot分析三個可用的新鮮顱內動脈瘤的標本。同時，我們正在通過體外細胞和動物模型來探討SPARC在動脈瘤發病中的作用機制。 三 研究結果： 1 HE染色結果顯示，光鏡下，動脈瘤（全層）幾乎看不到平滑肌，彈力纖維缺如，代之以膠原纖維；有時見壁層組織壞死和炎細胞浸潤，腔內可見血栓；動脈瘤有時有少量出血；常有附壁血栓，內膜纖維性增厚（膠原纖維）；中膜萎縮，彈力纖維斷裂/纖維化/鈣化，外膜纖維性增生；慢性炎症反應。 2 免疫組織化學染色表明，正常顱內willis動脈管壁的SPARC，mmp-2和mmp-9表現為低陽性或不染色；但人顱內動脈瘤組織的SPARC，mmp-2和mmp-9均表現為強染色。同時觀察到，不論未破裂動脈瘤還是破裂動脈瘤SPARC，mmp-2和mmp-9均表現為中至高強度的染色。統計分析表明，SPARC染色和mmp-2和mmp-9的染色的等級相關有統計學意義（p<0.001）。 3 Western-blot分析顯示動脈瘤組織與正常willis動脈環的動脈相比，顱內動脈瘤組織中的SPARC、mmp-2和mmp-9顯著上調。 四 研究意義： 通過本課題的研究，明確SPARC、MMP-2/-9蛋白的表達與顱內動脈瘤發生密切相關，且SPARC蛋白可能通過調控細胞外基質蛋白的表達影響動脈瘤的形成與進展；細胞外基質的破裂很可能是動脈瘤形成的病理生理過程，提供一個新的與顱內動脈瘤密切相關的潛在靶點。