SNARE蛋白複合體在花粉管頂端生長中的構成與作用

《SNARE蛋白複合體在花粉管頂端生長中的構成與作用》是依託中國農業大學，由李岩擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：SNARE蛋白複合體在花粉管頂端生長中的構成與作用
• 依託單位：中國農業大學
• 項目負責人：李岩
• 項目類別：面上項目

項目摘要

利用GFP和RFP載體轉化、抗體免疫螢光標記等方法研究AtSYP131等SNARE蛋白在花粉管內的分布和相關；利用T-DNA插入突變、過表達等方法，分析AtSYP131等Qa-SNARE蛋白在花粉管頂端生長方面的作用；利用酵母雙雜交、pull-down、BiFC等方法，分析花粉管中SNARE蛋白AtSYP131、AtSNAP30及AtVAMP725間相互關係。在本項目的研究基礎上，確認AtSYP131等SNARE蛋白在花粉管頂端囊泡分泌中的相關與作用。以期更深入理解特定SNARE蛋白複合體在花粉管頂端生長中的構成與作用。

結題摘要

GUS報告基因顯示，SNARE 蛋白AtSYP131與AtSNAP30主要在擬南芥花粉和花粉管內特異表達；利用GFP 和RFP 載體轉化、抗體免疫螢光標記等方法研究發現，AtSYP131 及AtSNAP30蛋白主要定位在擬南芥及菸草花粉管質膜上，其中AtSYP131蛋白與AtSNAP30蛋白在花粉管質膜上存在部分共分布；利用酵母雙雜交、螢光素酶雙分子螢光互補（LUC）及微量熱泳動（MST） 等方法，分析花粉管中大量表達的SNARE 蛋白AtSYP131、AtSNAP30 及AtVAMP725 間相互關係，研究發現AtSNAP30與AtSYP131及AtVAMP725間存在互作；利用T-DNA 插入突變等方法，分析AtSYP131蛋白及AtSNAP30等蛋白在花粉管頂端生長方面的作用，研究發現無論單突變體還是AtSNAP30與AtSYP131雙突變體，其花粉管生長速度均慢於野生型。以上研究結果表明， AtSNAP30與AtSYP131及AtVAMP725蛋白在花粉管頂端質膜上構成SNAREs複合體，AtSNAP30與AtSYP131與擬南芥花粉管頂端生長密切相關；由於此前我們已經發現AtVAMP725主要定位於花粉管頂端囊泡上，因此我們認為，由AtSNAP30與AtSYP131及AtVAMP725等蛋白形成的SNAREs複合體可能通過介導頂端囊泡與質膜融合，進而調控花粉管頂端生長。有關結果對理解花粉管頂端生長機理具有重要的理論意義。 在本項目及其它項目支持下，我們已發表兩篇SCI論文；另有兩篇文章正在整理中，期望在近期投稿高影響因子SCI刊物。