《SIRT1對小鼠神經幹細胞DNA損傷修復的作用機制》是依託同濟大學，由王賢麗擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：SIRT1對小鼠神經幹細胞DNA損傷修復的作用機制
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：王賢麗
- 依託單位：同濟大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
神經幹細胞（NSC）衰老與老年神經系統疾病密切相關，DNA損傷修復能力降低是幹細胞衰老的重要誘因，而目前有關NSC DNA損傷修復缺陷促使衰老的機制尚不明。前期工作發現，在DNA損傷誘導形成的小鼠NSC衰老模型中，SIRT1表達上調；抑制SIRT1表達，NSC DNA損傷程度增加，由此推測SIRT1可能參與NSC DNA損傷修復過程。本項目擬通過體外干擾SIRT1表達、體內條件性敲除SIRT1的方法，檢測SIRT1對NSC DNA損傷進行修復的作用；利用DNA雙鏈斷裂（DSB）修復報告系統檢測SIRT1參與非同源末端連線（NHEJ）的效率；利用免疫共沉澱的方法檢測SIRT1去乙醯化KU70參與NHEJ修復及其對KU70下游元件結合DNA損傷末端的調控作用。旨在闡釋SIRT1對小鼠NSC DNA損傷修復的作用及調控機制，為NSC的再生及抗衰老的套用研究奠定理論基礎。
結題摘要
神經幹細胞（NSC）衰老與老年神經系統疾病密切相關，DNA損傷修復能力降低是幹細胞衰老的重要誘因，而目前有關NSC DNA損傷修復缺陷促使衰老的機制尚不明。我們分別在細胞衰老模型、自然衰老狀態下檢測了小鼠SVZ區NSC的基因組穩定性及衰老的表型，並通過蛋白組測序得到多個可能參與調控基因組穩定性的基因，其中包括SIRT1基因。SIRT1是一種NAD+依賴的去乙醯化酶，能夠通過染色質修飾、沉默基因的表達以及對DNA損傷進行修復等多種方式維持基因組穩定性。在NSC衰老過程中,SIRT1表達上調；課題通過體內、體外多個水平驗證了SIRT1能夠通過維持基因組穩定性調控NSC細胞衰老的作用。為尋找SIRT1調控NSC細胞衰老的作用機制，我們利用SIRT1抗體進行了co-IP-MS實驗，並發現多個與SIRT1相互作用的蛋白。後續實驗將對這些蛋白進行驗證，並確定SIRT1調控基因維護基因組穩定性，從而延緩衰老的作用機制。
