《S1PR1/STAT3信號系統影響Th17細胞分化在AML發病中的作用及機制研究》是依託上海交通大學，由許曉倩擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：S1PR1/STAT3信號系統影響Th17細胞分化在AML發病中的作用及機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：許曉倩
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
急性髓系白血病（AML）中Th17細胞的作用尚存爭議，文獻報導Th17與AML發病及治療反應均存在密切聯繫。STAT3是Th17細胞分化、維持表型的主要轉錄因子。我們的前期研究顯示AML患者S1PR1和STAT3之間存在正向反饋,且初發AML患者外周血Th17細胞比例、骨髓S1PR1表達明顯高於正常對照。為此，我們提出假說：S1PR1/STAT3信號傳導途徑在AML中持續激活，抑制Th17細胞向Treg細胞分化維持其表型穩定從而在AML發病中發揮作用。為驗證這一假說，我們通過改變S1PR1表達水平、體外Th17細胞誘導分化、AML原位動物模型，從分子、細胞以及動物整體水平多方面探討S1PR1/STAT3正向反饋對Th17細胞表型的影響，揭示其在AML發病中的機制。本研究將從S1PR1/STAT3這個新視點揭示Th17在AML發病中的作用，為臨床AML治療提供新的靶點。
結題摘要
本研究通過收集臨床AML病例，發現CD4+T細胞中Th17、Treg亞群與AML患者的發病、預後密切相關，骨髓或外周血中，CD4+T細胞中Th17、Treg亞群比例在初發、難治AML患者顯著高於CR、健康對照（P＜0.01），治療緩解後Th17、Treg亞群比例下降。且骨髓、外周血中IL-6、IL-17水平在初發、難治患者中顯著高於CR、健康對照（P＜0.01）。Western Blot檢測結果顯示，外周血CD4+T中，初發、難治AML患者CD4+T細胞的S1PR1蛋白表達上調、STAT3磷酸化水平上調但總表達量不變，S1PR1蛋白表達上調是由於其mRNA轉錄水平升高所致（P＜0.01）。這些結果顯示，S1PR1/STAT3信號傳導通路在AML發病、預後中起到重要作用，可能與Th17、Treg亞群極化相關。課題組進一步在體外細胞實驗中上調小鼠Th17細胞的S1PR1表達、改變細胞免疫微環境，發現S1PR1表達上調、STAT3磷酸化水平上調後，小鼠Th17細胞FoxP3蛋白表達上調、向Treg極性分化。而通過RNA干擾抑制S1PR1表達後，小鼠Th17細胞FoxP3蛋白未出現表達，說明抑制S1PR1表達能穩定Th17細胞的極性。進一步並通過高通量信號通路磷酸化光譜篩選抗體晶片篩選出了59個潛在的這兩個信號傳導通路間可能的銜接通道，其中上調的磷酸化蛋白有12個、下調的有47個，為AML治療提供了潛在的免疫治療新靶點。為進一步驗證S1PR1/STAT3信號傳導通路對AML發病、預後的影響，通過建立S1pr1-/-、Stat3-/-小鼠，以及原位種植小鼠AML模型。課題組發現，S1pr1-/-、Stat3-/-小鼠上建立的原位AML模型，其發病晚且疾病進展緩於正常小鼠。過繼性輸注S1pr1-/-、Stat3-/-小鼠CD4+T細胞給Rag-/-小鼠，同樣也發現AML發病、進展均慢於對照組小鼠，且對照組小鼠在腫瘤種植後60天全部死亡，接受S1pr1-/-、Stat3-/- CD4+T細胞過繼性輸注的小鼠依然存活（P＜0.01），在體內實驗中驗證了體外實驗結果，本研究為AML的免疫治療提供新思路和潛在靶點。
