《Relaxin經cGMP-Zyxin-nucAkt通路改善左室舒張功能的機制研究》是依託華中科技大學，由帥欣欣擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：Relaxin經cGMP-Zyxin-nucAkt通路改善左室舒張功能的機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：帥欣欣
- 依託單位：華中科技大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
舒張性心衰發病率高且缺乏有效改善預後的藥物。心肌胞漿中Ca2+濃度調節異常是心肌舒張異常的關鍵，受磷蛋白（PLB）磷酸化和肌漿網鈣泵ATP酶（SERCA2a）活性異常為其重要因素。研究證實PLB是Akt下游底物，核內Akt被cGMP-Zyxin途徑激活並具有心血管保護作用。我們前期研究證實鬆弛素（RLX）能改善壓力負荷大鼠舒張功能，並能靶向激活細胞核內Akt，但其機制尚不明確。本項目擬通過構建腹主動脈狹窄的壓力負荷大鼠模型，經皮下滲透性微泵持續輸注RLX，行心臟超聲、Western Blot、免疫共沉澱等方法以及通過將RLX加入乳鼠心肌細胞並分別抑制cGMP、Zyxin、Akt磷酸化水平從大體、組織、細胞水平證實假說：RLX通過調節cGMP-Zyxin途徑使細胞核內Akt磷酸化增加，進而上調PLB磷酸化水平及SERCA2a活性改善左室舒張功能，為RLX用於舒張性心衰的治療提供理論基礎。
結題摘要
射血分數代償的心力衰竭(HFpEF)又稱舒張性心衰，約占全部心衰患者的50%，其發病率高且缺乏有效改善預後的藥物。鬆弛素（RLX）被證實有多重的心血管保護作用但是能否改善舒張功能目前尚不明確。心肌胞漿中Ca2+濃度調節異常是心肌舒張異常的關鍵，受磷蛋白（PLB）磷酸化和肌漿網鈣泵ATP酶（SERCA2a）活性異常為其重要因素。Akt是心肌細胞中最重要的激酶之一，是連線細胞信號及下游反應的重要樞紐。激活細胞核內和胞漿內的Akt在心血管方面具有完全不同的作用。本項目通過構建腹主動脈狹窄的壓力負荷大鼠模型，經心肌注射過表達RLX的腺病毒載體（Ad-RLX），行心臟超聲及有創血流動力學檢測來評估心臟舒張功能，並通過Western Blot、RT-PCR、雷射共聚焦等方法驗證心肌細胞中Akt、PLB、SERCA2a磷酸化水平以及活性。同時用Ad-RLX轉染乳鼠心肌細胞，通過上述方法檢測RLX對細胞核內和胞漿內Akt、PLB等磷酸化水平的影響。本研究結果證實：RLX能夠改善壓力負荷大鼠的舒張功能，其作用機制是通過使細胞核內Akt的Ser473 and Thr308位點磷酸化，而不激活胞漿內的Akt受體。進一步激活受磷蛋白（PLB）Ser16 and Thr17的位點磷酸化，從而增加SERCA2活性，使肌漿網鈣內流增多。該研究為RLX用於舒張性心衰的治療提供理論基礎。
