《ROR長非編碼RNA調控葡萄膜黑色素瘤轉移的機制研究》是依託上海交通大學，由范佳燕擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：ROR長非編碼RNA調控葡萄膜黑色素瘤轉移的機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：范佳燕
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
葡萄膜黑色素瘤（UM）是最常見的眼內惡性腫瘤，極易通過血行轉移至全身重要器官。然而，UM的轉移機制尚未明確。ROR是具有調控幹細胞再生能力的重要長非編碼RNA（lncRNA），研究表明ROR異常表達與乳腺癌等腫瘤發生存在密切關係，然而lncRNA-ROR在腫瘤發生中的致病機理仍不清楚。項目組前期研究發現lncRNA-ROR高表達於UM，沉默lncRNA-ROR表達降低UM細胞轉移能力，並導致其下游靶基因TESC表達下調。在此基礎上，本項目擬進一步通過染色質免疫共沉澱、染色體寡核苷酸沉澱、RNA免疫共沉澱、DNA親和吸附洗脫法等分子生物學技術手段，深入分析ROR介導的表觀遺傳修飾，揭示UM中lncRNA-ROR調控TESC的表達機理，並闡明TESC在UM發生中的關鍵作用。本項目的開展將有利於深入理解lncRNA-ROR在UM轉移中的調控機制，期望為UM轉移機制研究提供理論基礎和新思路。
結題摘要
葡萄膜黑色素瘤（Uveal Melanoma, UM）是成人最常見的眼內原發性惡性腫瘤，其發病率占眼內腫瘤的首位。此瘤的惡性程度高，且極易通過血行轉移至全身重要器官，以往研究認為UM 的發生和黑色素細胞相關成熟調控蛋白及其細胞周期通路有關，但UM的轉移機制尚未明確。本項目研究從表觀遺傳方向，以長非編碼RNA ROR（lncRNA-ROR）為切入點，通過基因晶片技術、染色質免疫共沉澱、RNA免疫共沉澱等分子生物學與表觀遺傳學的技術手段，明確lncRNA-ROR在UM發生中的重要作用，探究lncRNA-ROR介導下游靶基因TESC表觀遺傳修飾在UM轉移能力變化中的關鍵作用，進一步分析TESC基因在UM轉移中的重要功能，闡明UM發生中lncRNA-ROR調控TESC基因表達的作用模式。本項目研究發現，在UM中lncRNA-ROR高表達，利用shRNA靶向敲除lncRNA-ROR，發現腫瘤細胞轉移能力顯著下降；基因晶片結果和體外實驗進一步明確腫瘤細胞中TESC基因是lncRNA-ROR調控的關鍵靶基因，促進腫瘤細胞轉移。通過一些列表觀遺傳及分子實驗，項目組成員採用“誘餌效應”新思路，發現lncRNA-ROR通過與組蛋白甲基化酶G9A競爭性結合TESC啟動子，導致TESC在腫瘤細胞中高表達，促進腫瘤細胞增殖、遷移、成瘤能力。研究發表在權威雜誌《Genome Biology》，入選雜誌發表當期特別評論研究，並賦予“F1000論文”稱號，評價該成果：“揭示腫瘤發生新機制，是腫瘤研究的範例”。
