《RNF43介導的AKT/MDM2和NEDL1途徑調控肝癌細胞惡性行為的分子機制》是依託浙江大學，由邢春陽擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：RNF43介導的AKT/MDM2和NEDL1途徑調控肝癌細胞惡性行為的分子機制
- 依託單位：浙江大學
- 項目負責人：邢春陽
- 項目類別：青年科學基金項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
尋找新的生物治療靶標對提高肝癌的療效具有重要意義，我們前期通過Oncomine資料庫篩選獲得的RNF43具有明顯增強肝癌細胞的增殖、抗凋亡、侵襲、成瘤和血管新生能力，RNF43 表達沉默可致肝癌細胞內p53表達量的增加，RNF43 干擾前後的表達譜晶片生物信息分析發現p53途徑是RNF43調控網路的中心環節。本研究擬在RNF43誘導表達狀態下，通過化學抑制劑及siRNA技術特異性阻斷AKT 和NEDL1，闡明AKT/MDM2和NEDL1途徑在RNF43調控p53表達及肝癌細胞惡性生物學行為中的作用；觀察p53抑制狀態下RNF43表達變化對肝癌細胞功能的影響；進一步利用大樣本肝癌臨床標本，驗證RNF43與p53通路相關蛋白的表達或活化水平的內在聯繫，揭示RNF43經p53途徑對肝癌細胞功能調控作用的分子機制，為尋找新型的肝癌分子治療靶點提供理論基礎。
結題摘要
肝細胞癌是我國常見的癌症，位居癌症死亡率第三位。儘管以手術切除、栓塞化療及介入治療等方式的肝癌綜合治療體系已經形成，但是術後腫瘤高復發率仍是威脅患者長期生存的主要因素。此外，對於腫瘤晚期，無法實施手術的患者目前也尚無理想的治療方案，傳統治療方法療效近年來也難以有較大程度的提升，因此尋找和研究與腫瘤發生髮展有著密切聯繫的生物學靶點受到越來越多的重視。近年來一些研究證據和我們前期工作基礎明確了RNF43 在惡性腫瘤的發生、發展和腫瘤細胞惡性轉化中的作用。本研究從RNF43基因上游miRNA：miR-424及下游基因PHF8入手，首次闡明了miR-424-RNF43-PHF8細胞信號轉導通路在肝癌發生髮展中的促進作用。構建RNF43慢病毒表達載體，並篩選出穩定表達RNF43的肝癌細胞株，為後續RNF43在肝癌中的功能學研究奠定了細胞學基礎。發現miR-424是RNF43的上游調節基因，且miR-424通過調控RNF43的表達水平控制肝癌細胞的侵襲及增殖功能。篩選鑑定了miR-424及PHF8用於肝移植術後腫瘤復發的預測。通過miRNA和mRNA晶片，挖掘出一批miR-424-RNF43通路的下游調節小干擾RNA和mRNA（其中包括PHF8），為進一步闡明肝癌發生髮展的生物學機制奠定數據基礎。證實PHF8是RNF43的下游靶基因，且RNF43通過調控PHF8的表達水平控制肝癌細胞的體外和體內腫瘤發生和轉移。初步研究表明通過miR-424篩查將可使得部分超出米蘭標準的miR-424高表達患者在肝移植中收益，進一步研究將會確定基於miR-424表達水平肝移植受體嚴格的篩選標準，爭取擴大肝移植的收益人群。本課題證實抑制miR-424-RNF43- PHF8通路可抑制腫瘤細胞的惡性生物學行為。我課題組與浙江大學材化學院合作，擬研發針對RNF43蛋白分子選擇性抑制藥物。如研究成功，將會通過進一步通過生物學實驗驗證其安全性及治療肝癌的有效性。
