《RGR剪接變異體RGR-d在年齡相關性黃斑變性發病機制中的作用》是依託北京大學，由趙明威擔任負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：RGR剪接變異體RGR-d在年齡相關性黃斑變性發病機制中的作用
- 項目負責人：趙明威
- 依託單位：北京大學
- 項目類別：面上項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
年齡相關性黃斑變性（AMD）是一種與衰老相關的多因素退行性疾病，炎症、免疫與其發病密切相關。玻璃膜疣（drusen）的發生髮展被認為是AMD形成的標誌，而視網膜色素上皮細胞（RPE）的氧化損傷在玻璃膜疣發生髮展中起了關鍵作用。人 RGR（RPE retinal G protein-coupled receptor）是一種位於RPE細胞和Müller細胞上的跨膜蛋白，對於神經視網膜的存活和正常功能發揮起重要作用。人類RGR基因突變（RGR-d）可導致視網膜色素變性或周圍脈絡膜脈絡膜萎縮，然而RGR-d與AMD尤其是與玻璃膜疣形成的關聯尚不明確。本研究擬通過在培養的RPE細胞導入RGR-d基因突變以及體內RGR-d敲除的小鼠動物模型來探求RGR-d在亞細胞水平的具體位置、與玻璃膜疣形成的關係及對蛋白異常降解的影響，以明確RGR-d在AMD發病機制中的作用，為AMD的治療提供新的思路。
結題摘要
年齡相關性黃斑變性（AMD）是一種具有高發病率和高致盲率的眼病，據估計，全球AMD患者在2020年將達到2億。人視網膜色素上皮G 蛋白偶聯受體（RGR）是一種特異性表達於視網膜組織的跨膜視蛋白。RGR基因在轉錄過程中丟失第六位外顯子，產生剪接變異體RGR-d。RGR-d在AMD患者中存在於AMD患者的玻璃膜疣（Drusen）中和毛細血管間隙，並與補體因子C5b-9共定位。我們推測RGR-d作為一種異常蛋白，可能參與AMD，尤其是乾性AMD的發病。在本項目中，我們與美國南加州大學Keck醫學院合作，通過體內和體外水平驗證了RGR-d可能參與AMD的發病。在體外實驗中，我們利用CRISPR/Cas9構建了RGR-d小鼠，並觀察到RGR-d小鼠發展了視網膜色素上皮（RPE）下沉積物、視網膜變性等類似於人AMD樣的病理改變；在體外實驗中，我們通過質粒轉染ARPE-19細胞系構建RGR-d高表達，研究表明RGR-d可能通過激活Fas蛋白誘導細胞凋亡，造成RPE損傷。本項目以異常視蛋白RGR-d為切入點，構建了AMD的新型動物模型，有望為AMD的機制和治療研究提供平台，並探索了RGR-d參與AMD發病可能的發病機制，為AMD的治療策略提供新的思路和潛在的治療靶點。
