《RELMβ參與2型糖尿病腎病早期發生機制及其預測價值研究》是依託復旦大學，由楊葉虹擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：RELMβ參與2型糖尿病腎病早期發生機制及其預測價值研究
- 依託單位：復旦大學
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：楊葉虹
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
抵抗素樣分子β（RELMβ）是抵抗素樣分子家族成員之一，與細胞增殖、天然免疫等過程關聯，但其在糖尿病腎病（DN）中的研究尚未見報導。課題前期工作顯示2型DN患者血清RELMβ升高，且人群隨訪發現發生早期DN的患者在其尚無併發症階段亦已出現血清RELMβ升高，故推測RELMβ可能參與DN的早期發生，並可能成為預測早期DN的分子指標。本課題擬利用腎臟各種固有細胞進行高糖高脂等狀態下RELMβ表達定位分析，加入外源性RELMβ、過表達或沉默RELMβ表達後檢測細胞形態和增殖凋亡等改變；利用DN動物模型證實RELMβ表達定位及RELMβ動態改變與腎臟損害的關係；利用2型糖尿病無併發症人群進行前瞻性研究，比較RELMβ升高與微量白蛋白尿及項目組建立的決策樹模型診斷早期DN的時序關係。通過本研究證明RELMβ參與2型DN早期發生機制，血清RELMβ可作為預測DN的指標，為臨床防治DN提供有力的工具。
結題摘要
本研究根據有無糖尿病及蛋白尿分為不同病例對照組。檢測受試者血漿RELMβ及生化指標。構建DN大鼠模型，檢測腎臟組織及細胞內RELMβ的表達。高糖高脂干預腎臟細胞，檢測RELMβ蛋白的表達。不同濃度RELMβ蛋白干預腎臟細胞，檢測細胞增殖。構建過表達及沉默RELMβ基因的穩轉人腎臟細胞株，檢測細胞增殖凋亡、細胞周期及MAPKs通路活性的改變。PCR array篩選RELMβ可能調控的腎細胞轉導通路基因。結果提示 糖尿病微量白蛋白尿患者血漿RELMβ（201.68±27.77 pg/ml）較糖尿病無白蛋白尿患者（153.56±27.77 pg/ml）、非糖尿病無白蛋白尿者（142.90±4.12 pg/ml）及非糖尿病有白蛋白尿患者（141.41±8.85 pg/ml）明顯增高，而糖尿病無白蛋白尿患者、非糖尿病無白蛋白尿者及非糖尿病有白蛋白尿患者間無明顯差異。糖化血紅蛋白、臀圍、體脂含量、腎小球濾過率和收縮壓是血漿RELMβ水平的獨立影響因素。高血漿RELMβ水平患者出現糖尿病微量白蛋白尿的風險顯著增加。RELMβ蛋白主要集中在糖尿病腎病大鼠的腎小球系膜區以及人腎小球系膜細胞（HMC）的胞漿內表達。高糖、高脂可呈時間依賴性刺激HMC分泌RELMβ蛋白。210ng/ml RELMβ蛋白可顯著促進HMC增殖，而低濃度RELMβ蛋白對增殖沒有明顯影響。過表達RELMβ的HMC增殖顯著增加，干擾RELMβ的HMC增殖顯著抑制。過表達RELMβ可促進HMC由G0-G1向S期進展；干擾RELMβ可抑制HMC由G0-G1向S期發展。過表達RELMβ的HMC其p38和JNK MAPK的磷酸化活性增加，干擾RELMβ的HMC其p38和JNK MAPK的磷酸化活性下降，ERK1/2活性均沒有明顯影響。P38 MAPK通路抑制劑SB202190可以抑制由過表達RELMβ所引起的HMC的增殖。RELMβ基因對HMC凋亡無顯著影響。信號轉導通路發現者PCR Array晶片及RT-PCR驗證結果提示RELMβ基因可致HMC出現若干上調及下調的基因。這些基因主要集中在Jak-Stat通路、Wnt通路和Survival通路。
