《Pax6調控iPS細胞定向分化構建再生晶狀體的實驗研究》是依託中山大學，由婁秉盛擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：Pax6調控iPS細胞定向分化構建再生晶狀體的實驗研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：婁秉盛
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
白內障是全球首位的致盲疾病，目前使用的人工晶狀體因不具備天然晶狀體的生理結構，影響術後部分視功能的重建。本項目提出採用組織工程學技術構建與晶狀體囊袋生理性吻合的再生晶狀體的構想：套用細胞重編程技術將Oct4、Sox2、Klf4及c-Myc四個轉錄因子導入成年大鼠的晶狀體上皮細胞，獲得具備多向分化潛能的iPS細胞；以iPS細胞作為種子細胞，通過逆轉錄病毒將晶狀體發育過程中的關鍵基因Pax6導入iPS細胞，套用Cre/LoxP系統可逆性調節Pax6表達量，建立獲得再生晶狀體雛形的體外誘導模型，並探討Pax6在誘導iPS細胞定向分化中的作用及分子機制；將在體外培養獲得的初級再生晶狀體植入大鼠晶狀體摘除後的閉合囊袋內，利用體內微環境進一步整合，對再生晶狀體的組織形態、光學性能、安全性、分子生物學特性等進行全面分析評價。本項目旨在尋找構建生物人工晶狀體的最佳途徑，為白內障治療技術的革新提供新思路。
結題摘要
白內障是全球首位的致盲疾病，目前使用的人工晶狀體因不具備天然晶狀體的生理結構，影響術後部分視功能的重建。本項目中，我們採用不同的種子細胞探索其在體外誘導分化構建為再生晶狀體的可能性。首先，我們以牛晶狀體上皮細胞為種子細胞，在體外進行原代細胞培養後，成功導入Bmi-1，在晶狀體上皮細胞內過表達，將Bmi-1過表達的牛晶狀體上皮細胞暴露於新鮮的牛玻璃體液中持續培養，可促使晶狀體上皮細胞向晶狀體纖維細胞分化。另外，我們獲取成人尿液來源的腎上皮細胞，通過導入Oct4、Sox2、Klf4及c-Myc四個轉錄因子，使細胞重編程獲得誘導性多能幹細胞（iPS 細胞），以其作為種子細胞，在體外通過分階段添加生長因子，誘導細胞分化獲得晶狀體上皮樣細胞及晶狀體樣小體，並探索microRNA在晶狀體分化中的作用。
