《PPARγ拮抗Egr-1對增生性瘢痕TGF-β1促纖維化信號的作用及機制》是依託中國人民解放軍第四軍醫大學，由胡大海擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：PPARγ拮抗Egr-1對增生性瘢痕TGF-β1促纖維化信號的作用及機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：胡大海
- 依託單位：中國人民解放軍第四軍醫大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
皮膚燒（創）傷後的增生性瘢痕發病率高，相關機制尚不清楚，臨床療效不確定，為組織修復領域亟待解決的難題之一。過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)激動劑抗纖維增生性疾病的有效作用逐漸引起人們的關注。我們前期實驗發現PPARγ激活後具有抑制TGF-β1誘導皮膚肌成纖維細胞表型轉化作用，然而對PPARγ和TGF-β1信號通路間的分子調控（cross-talk）機制目前尚不清楚。本課題擬以燒傷後增生性瘢痕為研究對象，檢測激活PPARγ對成纖維細胞TGF-β1通路的相關分子的拮抗作用。進而依據核轉錄中Smads入核分子Smad3/4同PPARγ可能的作用分子為篩選靶分子，以轉錄因子Egr-1為交叉點，通過電泳遷移率分析、DNA親和沉澱、基因轉染過表達Egr-1與siRNA沉默、基因敲除動物等方法，揭示PPARγ同Egr-1間的調控機制。為增生性瘢痕機制研究和尋找有效治療途徑，提供新靶點。
結題摘要
皮膚纖維化是由細胞外基質蛋白進行性沉積引起，並導致在皮膚中形成異常的瘢痕。不正常的瘢痕引起諸多嚴重的臨床問題，如皮膚功能改變，關節活動障礙和美容問題等。我們的研究已經確定，核受體過氧化物酶體增殖物激活受體-γ（PPAR-γ）激動劑能夠激活PPAR-γ來調節ECM蛋白的表達。首先，我們利用高通量晶片篩選，發現在增生性瘢痕成纖維細胞中，miR-181c和miR-10a表達異常，通過生物信息學和實驗分析，證實分別表達並靶向uPA和PAI-1。其次，我們在體外模型中研究增生性瘢痕成纖維細胞的基本分子機制和基因相互作用。這些發現表明PPAR-γ-miR-145-Smad3軸在調控增生性瘢痕成纖維細胞的膠原合成中發揮關鍵作用。第三，根據高通量晶片數據研究PPAR-γ激動劑曲格列酮治療瘢痕疙瘩成纖維細胞的基本分子機制。我們進一步揭示曲格列酮治療瘢痕疙瘩成纖維細胞下調早期生長反應-1（Egr1）和膠原蛋白-1的表達。這部分表明PPAR-γ激動劑介導的miR-543和Egr1信號通路在抑制瘢痕疙瘩成纖維細胞膠原合成中發揮重要作用。第四，根據蛋白質晶片數據，我們證明了PPAR-γ誘導的miR-92b表達抑制Axl表達，進而降低KF中TGF-β1和下游基因的表達，表明靶向這種新的基因途徑可能是有用的用於治療纖維化或瘢痕疙瘩。最後，我們的工作得到國際同行的認可， Chemo Open Access邀請我們發表述評。我們簡要總結了課題組的工作，我們認為miRNA調節PPAR-γ激動劑曲格列酮抑制膠原合成和下游靶點的能力。本項目的研究成果，解釋了miRNA在PPAR-γ激動劑治療瘢痕中的分子機制，這些miRNA有望轉化為靶向治療瘢痕的藥物。
