《PP結中Tfh細胞在調節IgA產生及腸道微生物中作用機制的研究》是依託清華大學，由白雪擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：PP結中Tfh細胞在調節IgA產生及腸道微生物中作用機制的研究
- 依託單位：清華大學
- 項目負責人：白雪
- 項目類別：青年科學基金項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
腸道免疫與機體內部其它的免疫系統不同，它的主要特徵之一是需要富集一定種類及數量的微生物，這與腸道本身高水平的IgA有關。目前許多研究均推測腸道PP結中濾泡輔助性T細胞(Tfh細胞)可以對IgA水平及腸道微生物的維持發揮重要的作用，但是目前沒有直接的證據證明這個觀點。本研究將利用Bcl6(fl/fl)/CD4cre小鼠研究Tfh細胞缺陷時PP結的生髮中心、B細胞表達AID水平、PP結及腸道IgA水平，以及腸道微生物種類和數量的變化，然後再對4周齡Bcl6(fl/fl)/CD4cre小鼠分別補充來源於Bcl6-RFP小鼠的PP結或淋巴結的Tfh細胞重新觀察以上指標，確定PP結中Tfh細胞在調節IgA及腸道微生物中的作用。同時通過檢測PP結與淋巴結中Tfh細胞轉錄譜的差異，以及進一步的體外及體內實驗驗證來確定PP結中Tfh細胞的何種特性或機制會對腸道IgA的產生及腸道微生物的維持負責。
結題摘要
本研究利用Bcl6(fl/fl)/CD4cre小鼠研究Tfh細胞缺陷時腸道的免疫穩態，腸道對病原菌防禦的變化，以及在穩定狀態中腸道共生菌種類和數量的變化。另外我們進行了第二部分的延伸實驗，研究了Tfh細胞的轉錄因子Bcl-6在T細胞誘導腸炎中的作用。 第一部分：Tfh細胞在抵抗腸道病原菌感染過程中的作用。我們對Bcl6(fl/fl)/CD4cre及WT小鼠進行病原菌Citrobacter Rodentium（C.R）感染，我們發現Tfh細胞缺陷的小鼠在感染的後期（12天以後）對C.R感染的防禦有明顯的缺陷，與WT小鼠比有顯著的差異。在C.R感染後，KO組小鼠在後期表現出體重下降，腹瀉、血便、病原菌大量侵入機體內，小鼠出現死亡，這與WT小鼠有顯著的差異，這些提示KO組小鼠發生了更嚴重的腸炎。我們同時發現KO組小鼠的這種缺陷與其機體內IgG1的缺失有很明顯關係，同時這種抵抗病原菌的缺陷可以被來源於感染後的WT小鼠的血清挽救。所以，我們以上的研究提示，Tfh細胞依賴的體液免疫-IgG1在抵抗腸道病原菌感染過程中扮演著關鍵的作用。 關於獲得免疫系統在控制腸腔內的共生菌的部分，我們得到了大部分的結果， 我們在Tfh細胞敲除小鼠與Tfr細胞敲除小鼠中分別觀察到PP結及固有層中的抗體，B細胞及腸道共生菌均發生了相應的改變，這些結果表明Tfh細胞對腸道內共生菌的調控有重要的作用。 第二部分：我們驗證了Tfh細胞轉錄因子Bcl-6在T細胞誘導腸炎過程中的作用。我們使用Bcl6缺陷的和正常的 CD4 T細胞分別靜脈注射於RAG1-/-小鼠中，去誘導腸炎。我們發現在3-4周后，WT組T細胞注射的小鼠發生了嚴重的腸炎，而注射Bcl6缺陷的T細胞並不能導致明顯的腸炎。我們接下來的結果表明Bcl6缺陷的T細胞在注射到RAG1-/-鼠後在誘導炎症過程中增殖有明顯缺陷，這些提示T細胞的Bcl6的表達在T細胞誘導腸炎過程中發揮著重要的作用。
