PDGF-B促血管周細胞募集抑制腎癌轉移的機制研究

《PDGF-B促血管周細胞募集抑制腎癌轉移的機制研究》是依託天津醫科大學，由姚欣擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：PDGF-B促血管周細胞募集抑制腎癌轉移的機制研究
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：姚欣
• 依託單位：天津醫科大學

中文摘要

轉移性腎癌的治療是當今的難題。前期研究表明，腎癌新生血管存在明顯的周細胞分布缺陷現象，而缺乏周細胞的未分化型血管密度與腎癌轉移明顯相關；基因晶片數據提示，周細胞募集相關基因PDGF-B 在轉移性腎癌中表達下調最明顯。據此，我們提出PDGF-B 低表達與新生血管成熟障礙及腎癌轉移有密切關係的假設。本項目擬在組織水平，明確PDGF-B 與腎癌新生血管分化成熟及腫瘤轉移的關係；通過增強腎癌細胞PDGF-B表達，探討其對周細胞遷移能力的影響，建立PDGF-B過表達腎癌小鼠模型，研究其對周細胞募集、血管分化成熟和腎癌增殖轉移能力的影響；通過蛋白組學/生物信息學方法篩選與PDGF-B調控 血管成熟功能相關蛋白，揭示PDGF-B促使周細胞在血管周圍募集並抑制腎癌轉移的分子機制。本項目既為深化前期研究結果提供分子機制依據，也對探索以促進新生血管正常化為方向的腫瘤抗血管生成治療研究具有重要理論意義。

結題摘要

新生血管生成最終依賴幹細胞來源的周細胞募集和定向分布形成成熟血管。血小板衍生生長因子（PDGF）-BB過表達促進周細胞募集到血管壁,從而增加腫瘤血管的穩定性，同時周細胞募集可導致抗血管新生藥物的耐藥,因而聯合針對內皮細胞和周細胞的聯合靶向治療已經提出。然而前期研究表明，腎癌新生血管存在明顯的周細胞分布缺陷現象，而缺乏周細胞的未分化型血管密度與腎癌轉移明顯相關。在本研究中，我們旨在評估由PDGF-BB介導的周細胞募集在腎細胞癌腫瘤生長和進展的作用。 首先，明確人腎癌組織中 PDGF-B 表達與周細胞包繞率的關係。分析CD34及PDGF-B在的表達，及其表達水平與病理分級、預後及轉移等變數的關係。通過體內及體外實驗探討 PDGF-B 過表達腎癌細胞對於周細胞募集、血管成熟以及腫瘤轉移作用以及可能的分子生物學機制。體外實驗通過增強腎癌細胞PDGF-B 表達，研究PDGF-B對腫瘤細胞本身增殖能力的影響；Western-blot 分析周細胞和內皮細胞PDGFRβ蛋白磷酸化水平；FCM測定PDGF-B 對細胞增殖的影響；遷移實驗觀察細胞遷移能力的改變；管腔形成實驗分析對細胞體外形成血管結構的影響。進而建立PDGF-B 過表達腎癌小鼠模型，研究其對腫瘤細胞體內增殖和轉移的影響。微陣列分析探討Van Andel研究所中腎透明細胞癌患者的PDGFB / PDGFR基因在預後不同的組間的表達。PDGF-B的表達量的多少與血管周細胞包繞率成正相關。PDGF-B的表達與成熟微血管密度成正相關。PDGF-B表達量越低，腫瘤直徑越大，腫瘤的病理分級及臨床分期越高，且腫瘤越容易出現遠處轉移，腫瘤病人的生存預後越差。體外實驗證實PDGF-BB過表達使周細胞的增殖、遷移及形成能力增強從而增加周細胞募集。最後，體內實驗證實PDGF-B 高表達可減少腫瘤生長和進展的發生。腎癌屬於富血管型腫瘤，對於腎癌細胞調節周細胞遷移與分布，及其與腫瘤轉移關係的研究尚不多。隨著人們對腫瘤-宿主微環境相互作用認識逐步深入，修復血管內皮外周微環境，促進新生血管“正常化”，成為抗腫瘤血管生成治療的新熱點。因此，探索PDGF-B 在腎癌血管成熟過程中的作用，為腎癌抗血管生成治療提供新的機制和研究切入點。我們研究表明針對周細胞的靶向治療在腫瘤治療中存在爭議,需進一步研究其在不同腫瘤微環境中作用。