《P19細胞神經分化相關ppGalNAc-T13的功能解析》是依託上海交通大學，由張延擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：P19細胞神經分化相關ppGalNAc-T13的功能解析
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：張延
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
神經細胞發育分化與細胞-細胞外基質相互作用密切相關，細胞膜蛋白的糖基化參與細胞與細胞外基質的相互作用，50%以上的細胞膜蛋白為糖基化蛋白。 已有文獻報導O-糖鏈的Core1結構對於果蠅神經發育是不可或缺的，作為細胞膜蛋白的重要的O-糖基化修飾在神經細胞發育分化過程中的機理尚不明確。本項目以小鼠P19細胞神經方向分化模型為研究對象，研究神經細胞特異性表達的O-GalNAc糖鏈起始反應酶的ppGalNAc-T13在細胞神經分化過程中的功能機制，尋找ppGalNAc-T13在P19細胞神經分化過程中的糖基化靶向蛋白，探究O-糖鏈結構及分布變化與神經細胞生長發育之間的關係，為揭示O-糖基化在神經系統發育過程中的分子作用機理奠定基礎。
結題摘要
本項目以小鼠畸胎瘤細胞系P19C6體外神經誘導分化模型為研究對象，研究O-GalNAc糖鏈起始反應酶之一ppGalNAc-T13在神經分化過程中的功能機制，尋找T13在神經分化發育過程中的糖基化靶向蛋白，探究O-糖鏈結構及分布變化與神經分化之間的關係。首先我們在全反式維甲酸（ATRA）誘導下P19C6細胞的神經分化階段以及小鼠大腦發育和原代皮層神經元成熟過程中，確認了ppGalNAc-T13的上調錶達，並伴隨有蛋白質O-糖基化水平的升高。同時在非誘導條件下，過表達ppGalNAc-T13的P19C6細胞形態上出現了神經突起樣結構，且同樣出現細胞整體O-糖基化水平上升現象。運用活體細胞代謝性標記結合二維電泳分離和點擊化學反應檢測的手段，我們在過表達ppGalNAc-T13的P19C6細胞中檢測到O-糖基化水平升高的ppGalNAc-T13可能潛在修飾蛋白。在穩定抑制ppGalNAc-T13表達後，P19C6細胞在誘導期死亡加劇，且神經分化被抑制。免疫螢光共定位發現ppGalNAc-T13定位於細胞內質網及神經軸突中。以上研究首次觀察和分析了蛋白質O-糖基化轉移酶在細胞神經分化發育過程中的作用，為進一步揭示蛋白質O-糖基化在神經軸突延伸中的調控研究奠定了基礎。
