OECs體外血管化DBM的血管與宿主血管融合機制研究

《OECs體外血管化DBM的血管與宿主血管融合機制研究》是依託昆明理工大學，由譚洪波擔任項目負責人的地區科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：OECs體外血管化DBM的血管與宿主血管融合機制研究
• 項目類別：地區科學基金項目
• 項目負責人：譚洪波
• 依託單位：昆明理工大學

項目摘要

大段骨缺損治療仍是骨科的一大難題，組織工程為解決骨缺損治療中移植骨來源缺乏的難題帶來了希望，大體積的組織工程骨早期快速血管化是目前組織工程構建的一大障礙。OECs能在體內促進組織的血管生成，在體外培養時具備較強的體外成小管能力和血管生成能力。自體OECs在體外將骨支架預先血管化，再將預先血管化的支架植入體內加速體內血管生成可能是解決骨組織工程血管化的一個可行方法。但體外血管化的骨組織工程支架能否同體內血管融合（inosculation）成為一個關鍵的科學問題。為此本課題在脫鈣骨基質支架血管化及骨缺損修復重建研究的基礎上，研究將骨髓來源OECs動態灌注培養來體外血管化較大體積脫細胞骨支架，進一步利用動物模型研究OECs在骨組織工程支架體外所構建血管與宿主血管融合機制，將為未來套用及製備生物學性能更優越的骨組織工程產品提供理論依據，對骨組織工程血管化的進一步發展及大段骨缺損或損傷治療創造條件。

結題摘要

大段骨缺損或骨壞死治療仍是骨科的一大難題，大體積的組織工程骨早期快速血管化是目前組織工程構建的一大障礙，本課題組認為OECs能在體外血管化，體外血管化的支架植入體內加速融合體內血管可能是解決骨組織工程血管化的一個可行方法。項目獲得批准後，項目負責人積極組織項目組成員進行開題論證，並按照計畫書內容進行分工。截止2017年12月份，已經按計畫完成任務書所有研究內容，取得研究成果包括：⑴完成人外周血OECs的分離、培養、增殖、鑑定及eGFP-OECs穩定轉染細胞株的篩選；⑵完成內皮祖細胞體外的動態灌注培養系統的設計、組裝並改良；⑶通過動態灌注系統給予脫鈣骨基質上晚期內皮祖細胞持續不斷的流體剪下應力，明確了其促進晚期內皮祖細胞在脫鈣骨基質上的鋪展粘附、增殖、向成熟內皮細胞分化和基質孔隙中三維成管，促進脫鈣骨基質體外預血管化的相關機制；⑷建立裸鼠背部血管化動態觀察窗，結合尾靜脈注射德克薩斯紅標記的右旋糖酐標記血漿，與單純觀察窗模型微血管觀察比較，記錄微血管開始顯影時間，最佳觀測時間及顯影持續時間；⑸完成裸鼠背部血管化動態觀察窗中植入靜態培養和動態灌注培養的OECs-DBM支架，分別在植入後動態觀察並計數支架邊緣長入血管數量，通過光密度值來反映支架獲得的血液灌注量。最後行組織學觀察，螢光細胞的分布及其與受體血管融合情況；⑹利用數位化設計 3D 列印技術製作手術導航模板，結合液氮冷凍技術，精確定位並製作犬股骨頭壞死模型，將雙相磷酸鈣陶瓷材料用於股骨頭壞死動物模型的治療，並探討該技術的可行性；⑺探討數位化技術重建及測定股骨頭壞死體積的可行性。⑻探討數位化設計結合3D 列印技術製備的導航模板套用於治療股骨頭缺血性壞死的可行性，並觀察早期療效。