《Nrf2調控BRCA1的轉錄、功能及其啟動子上組蛋白密碼的研究》是依託復旦大學，由金偉擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：Nrf2調控BRCA1的轉錄、功能及其啟動子上組蛋白密碼的研究
- 依託單位：復旦大學
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：金偉
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
BRCA1基因的沉默或變異是導致乳腺癌發生的主要原因之一。本人已經發現Nrf2能夠結合於BRCA1基因的啟動子上並激活BRCA1的轉錄，本課題的目的就是要揭示Nrf2對BRCA1基因轉錄的調控作用和對BRCA1功能的影響，找出Nrf2在BRCA1基因啟動子上的精確作用位點以及Nrf2對BRCA1基因啟動子上的組蛋白密碼的影響，並找出能夠與Nrf2形成轉錄複合物的其它轉錄因子，以及它們對BRCA1基因轉錄的調控作用。.本課題在基因的啟動子水平和組蛋白水平研究Nrf2調控BRCA1基因轉錄的機理，有助於分析轉錄因子與DNA之間的相互作用以及組蛋白修飾狀態對基因轉錄的影響，具有重要的基礎理論研究價值，屬於生命科學研究中的前沿領域；本課題還有助於發現乳腺癌變或乳腺癌康復過程中新的分子靶點和新的分子機理，對於指導臨床治療乳腺癌具有實際的套用價值。
結題摘要
BRCA1基因的沉默或變異是導致乳腺癌發生的主要原因之一。有些轉錄因子可以結合到BRCA1基因的啟動子上調節其轉錄。 本課題中我們採用報告基因檢測技術發現Nrf2能夠顯著激活BRCA1啟動子的活性；採用點突變和報告基因檢測技術發現BRCA1的啟動子上ARE元件反向序列突變後，Nrf2激活BRCA1啟動子的作用顯著下降，證明Nrf2是通過結合於BRCA1的啟動子上ARE元件反向序列來激活BRCA1啟動子的活性。採用EMSA技術發現Nrf2確實能夠結合於BRCA1的啟動子上ARE元件反向序列。 通過檢測，我們發現BRCA1在HCC38細胞中表達量極低，在MCF-7細胞中表達量較高；在HCC38細胞中，BRCA1與BARD沒有形成二聚體，BRCA1啟動子上的組蛋白乙醯化程度極低，Nrf2與CBP、p300形成的轉錄複合物結合量少；而在MCF-7細胞中BRCA1與BARD可以形成二聚體；BRCA1啟動子上的組蛋白乙醯化程度極高，Nrf2與CBP、p300形成的轉錄複合物結合量顯著增高。 在HCC38細胞中高表達Nrf2後，可以顯著升高BRCA1的表達，恢復BRCA1與BARD形成二聚體的能力，提高BRCA1啟動子上的組蛋白乙醯化程度，BRCA1啟動子上的Nrf2與CBP、p300形成的轉錄複合物結合量顯著增高。 在MCF-7細胞中採用siRNA抑制Nrf2的表達後，可以顯著降低BRCA1的表達，BRCA1與BARD不能形成二聚體，顯著降低BRCA1啟動子上的組蛋白乙醯化程度，BRCA1啟動子上的Nrf2與CBP、p300形成的轉錄複合物結合量顯著下降。 在90例乳腺腫瘤中，採用免疫組化技術，發現Nrf2和BRCA1的表達呈顯著正相關。 本研究發現，Nrf2與CBP、p300形成的轉錄複合物能夠結合於BRCA1基因的啟動子上並激活BRCA1的轉錄；Nrf2可以成為乳腺癌變或乳腺癌康復過程中新的分子靶點，對於指導臨床治療乳腺癌具有實際的套用價值。
