《Nox4/ROS在H2S抗心肌纖維化中的作用研究》是依託復旦大學，由潘禮龍擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：Nox4/ROS在H2S抗心肌纖維化中的作用研究
- 依託單位：復旦大學
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：潘禮龍
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
線粒體氧自由基（ROS）是誘導心肌纖維化的關鍵因素，NADPH氧化酶4（Nox4）是心肌纖維化過程中ROS的主要來源，因此，Nox4/ROS可能成為治療心肌纖維化的新策略；硫化氫（H2S）在心血管系統中由胱硫醚-γ-裂解酶（CSE）產生並在心血管系統中發揮重要作用。心肌成纖維細胞（CFs）激活是心肌纖維化的關鍵環節，我們已發現H2S抑制血管緊張素（AngⅡ）誘導的CFs表達Nox4、ROS以及膠原產生；同時H2S抑制缺血心肌中的Nox4表達、ROS產生以及纖維化，表明H2S可能通過抑制Nox4/ROS發揮抗心肌纖維化作用，但尚無直接證據。本項目通過觀察在AngⅡ誘導CFs纖維化反應和心力衰竭模型上，結合慢病毒過表達/siRNA干擾技術，觀察CFs增殖、分化、Nox4表達、線粒體ROS等，揭示調控Nox4/ROS是H2S抗纖維化的關鍵環節。本課題將揭示H2S抗心肌纖維化新機制。
結題摘要
背景 揭示調控Nox4/ROS是H2S抗纖維化的關鍵環節，為H2S治療心肌纖維化過程提供理論依據；另外，Nox4還可能作為其它小分子化合物治療心肌梗死的靶點； 內容 通過冠狀動脈結紮造心肌梗塞模型；採用Ang II激活心肌成纖維細胞；檢測缺血心肌和Ang II 刺激的心肌成纖維細胞中的纖維化反應。通過觀察硫氫化鈉NaHS對Nox4、ROS產生、ERK1/2磷酸化水平、HO-1、CSE、α-SMA、CD34、VEGF、MMP-9、膠原（collagen）的作用來闡明H2S對纖維化反應的保護作用及機制；通過藥物篩選發現小分子化合物益母草鹼(leonurine)具有抑制Nox4的作用，通過益母草鹼對心肌梗死大鼠治療，觀察心肌成纖維細胞激活及心肌梗死情況。 結果 給予NaHS抑制Ang II刺激的成纖維細胞中α-SMA、CTGF和I 型膠原的表達而上調HO-1蛋白表達；NaHS 抑制Ang II誘導的成纖維細胞表達Nox4蛋白表達而伴隨著細胞內ROS產生減少、抑制ERK1/2磷酸化水平和 CTGF表達；在心肌梗塞模型中，給予NaHS也可緩解心肌組織中的Nox4 表達和纖維化反應；此外，給予NaHS還可抑制早期心肌炎症反應和上調HO-1和CSE蛋白表達；心肌梗死後42天，外源性H2S顯著性降低心肌纖維化面積以及膠原1和膠原3含量、MMP-9表達，並且明顯改善心功能相關指標；另外，給予外源性H2S還可顯著性提高缺血心肌中的新生血管的密度，包括微血管（CD34）、微動脈（α-SMA）。益母草鹼具有顯著抑制Nox4的表達及活性，發揮Ang II誘導的成纖維細胞內ROS產生、MMP-2/9表達及活性、α-SMA和膠原表達，並且益母草鹼具有改善缺血心肌的心功能、Nox4表達及其介導的炎症反應 科學意義 Nox4是H2S抗心肌纖維化的關鍵環節並且可作為抗心肌纖維化的靶點。
